胡显惠，李辉，唐晨曦，苏云娟，经廷森

（重庆市綦江区人民医院，重庆401420）

支气管哮喘（bronchial asthma, BA）是一种常见的与免疫功能紊乱相关的慢性肺部疾病，临床症状主要为反复发作的喘息、胸闷、咳嗽和气促等，严重影响患者的身体健康和生活质量。支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、T 淋巴细胞、肥大细胞、中性粒细胞等多种炎症细胞和细胞组分参与的慢性气道炎症疾病[1]。哮喘的发病是遗传因素和环境因素综合作用的结果，传统观点认为Th1/Th2细胞功能失衡在哮喘的发生、发展中有重要作用，但尚不足以解释哮喘发病的全部机制[2]。近年来Th17 细胞和Treg 细胞的被发现及其在炎症中的作用进一步完善了支气管哮喘发病的免疫学机制[3]。白细胞介素（Interleukin, IL） -35 （IL-35） 是由Treg 细胞分泌的抗炎症细胞因子，在维持T 细胞稳态中有重要作用[4]。本研究旨在研究重组IL-35（rIL-35）对支气管哮喘模型小鼠T 淋巴细胞亚群及细胞因子的影响，并探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物和细胞

SPF 级雄性BALB/c 小鼠100 只，7 周龄，体重19～22 g，购自北京维通利华有限公司[实验动物生产许可证号：SCXK（京）2016-0003]，于24～26℃、相对湿度50%～60%、通风良好的SPF 级屏障室内饲养，期间自由进食及饮水。中华仓鼠卵巢细胞（CHO 细胞）购自ATCC 细胞库，采用DMEM 高糖培养基（含10%PBS、1%青链霉素）在5%二氧化碳、37℃的培养箱中培养。

1.2 试剂

佛波酯（PMA）、离子霉素（ionomycin）、布雷非德菌素（BFA）、卵白蛋白（OVA）和乙酰甲胆碱均购自美国Sigma公司，淋巴细胞分离液购自北京索莱宝科技有限公司，抗小鼠CD4-FITC 抗体购自艾美捷科技有限公司，抗小……