尹金良，徐文，郭占龙，郭丹丹，姚为民，赵大鹏，张雪梅，常军亮，吴业红

长春生物制品研究所有限责任公司，吉林 长春 130012

目前，流感疫苗仍主要在鸡胚中生产，但存在生产周期长、易污染、操作繁琐、工作量大、不易于质量控制等缺点，如发生禽流感时，鸡胚供应还会严重限制疫苗的生产及产量，因此，WHO积极推荐各国以哺乳动物细胞部分替代鸡胚生产流感疫苗［1］。MDCK细胞是Madin和Darby于1958年从美国Cocker Spaniel犬肾脏组织中分离培育建立的细胞株［2］，由于其病毒感染效率高，增殖快，且不易变异，被公认为是最适于流感病毒繁殖的3种细胞系之一［3］。目前国外已有两家公司的悬浮MDCK细胞基质亚单位流感疫苗上市，临床结果显示，免疫原性和安全性与鸡胚流感疫苗相当［3］。

在以传代细胞系作为疫苗生产基质制备疫苗的过程中，生产的病毒收获液经下游纯化后可能会有宿主细胞蛋白的残留。宿主细胞残留蛋白可能会引起机体过敏反应，并对疫苗等生物制品的免疫效果产生一定的影响［4］。宿主细胞蛋白在生物制品中的残留量反映的不仅是制品批间的一致性，还是衡量生物制品质量的一个重要指标［5］。《中国药典》三部（2015版）中对基于传代细胞培养的病毒性疫苗的宿主细胞蛋白（host cell protein，HCP）含量控制提出了一定要求，如基于Vero细胞基质生产的冻干乙型脑炎灭活疫苗的Vero细胞HCP残留质量浓度应不高于 2 μg／mL［6-7］。因此，控制生物制品中的宿主细胞残留蛋白含量是保证疫苗质量的关键因素。

目前，检测生物制品中宿主细胞残留蛋白含量的方法有SDS-PAGE、HPLC、毛细管电泳和质谱法、ELISA、Western blot等。……