牛传染性鼻气管炎病毒多表位嵌合蛋白的表达及免疫原性分析
2021-02-25仝晓丹王俊冉旭华倪宏波闻晓波
仝晓丹 ,王俊 ,冉旭华 ,2,倪宏波 ,闻晓波 ,2
1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆 163319;2.海南大学动物科技学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南 海口 570228
牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)又称牛 1型疱疹病毒(bovine herpesvirus 1,BHV-1),是危害养牛业发展的一种重要病原体,可导致鼻炎、阴道炎、肠炎、结膜炎、流产和脑炎等[1],进而继发其他病原体感染,加速动物死亡。IBRV急性感染后在三叉神经节形成潜伏感染,受到应激因素刺激后,可重新激活并向体外排毒,这给控制和消灭IBRV导致的相关疾病造成极大困难[2]。目前,一些国家通过扑杀阳性血清牛根除了该病,但耗资巨大,阳性率高的国家主要通过疫苗免疫来防控[3]。常用的疫苗主要有灭活疫苗、弱毒活疫苗、核酸疫苗和基因缺失疫苗。灭活疫苗虽能诱导较好的体液免疫,但免疫期短;弱毒活疫苗存在毒力返强可能。近年,欧洲一些发达国家多使用基因缺失疫苗用于牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR)的防治与净化,但基因缺失技术不完善,存在毒力返祖的可能性[4]。因此,研发更安全有效的疫苗在防控IBR中十分重要。由于基因工程亚单位疫苗具有稳定性强、安全性高及易制备等优势,已成为疫苗的研究热点,但其免疫原性较弱,限制了相关疫苗的研发进展[5]。与传统基因工程亚单位疫苗比较,多表位疫苗除可克服MHC类分子限制获得高效递呈外[6],还可消除多个全蛋白引起的容量限制[7]。
本研究利用基因工程方法制备含有IBRV已鉴定出的gB、gC和gD抗原表位及破伤风毒素通用T细胞表位P2的嵌合蛋白,并进行纯化,检测其在中国白兔体内的免疫原性,为进一步研发IBRV基因工程亚单位疫苗奠定基础。……
