赵文苹，王建发，范春玲

黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江省牛病防制重点实验室，黑龙江 大庆 163319

乳房炎是全球公认的奶牛三大疾病之一，对奶牛养殖业造成的经济损失位居各类疾病之首，细菌感染是导致奶牛发生乳房炎的最重要因素。乳腺上皮细胞是细菌感染与乳腺免疫的初始重要交汇处，在该交汇处乳腺上皮细胞启动了机体对病原微生物最早的免疫识别和免疫应答，并发挥协调后续免疫分子、免疫细胞应答的重要作用。乳房炎的致病微生物主要有大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等。

脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）又称内毒素，是大肠埃希菌细胞壁的主要成分，可激活乳腺上皮细胞表面的模式识别受体，引发一系列的免疫反应。外泌体（exosome）是细胞对外分泌的小囊泡，直径为40～120 nm的膜包裹结构，可特异性包裹一些蛋白质、脂质或核酸等物质，具有生物活性，能够被受体细胞吸收，参与细胞通讯、细胞迁移、免疫应答、炎症反应、血管新生和肿瘤细胞生长等过程［1］。奶牛乳腺感染大肠埃希菌后，上皮细胞产生的外泌体可能以远距扩散的方式调节中性粒细胞等固有免疫细胞功能，进而影响乳腺炎症的发生发展过程。为明确大肠埃希菌感染对乳腺上皮细胞产生外泌体的影响，本研究对LPS刺激奶牛乳腺上皮细胞后产生的外泌体进行分离鉴定，并与正常培养的乳腺上皮细胞外泌体特征进行比较。

1 材料与方法

1.1 细胞 奶牛乳腺上皮细胞系由黑龙江八一农垦大学生物技术中心牛病重点实验室提供。……