高媛 ，郭敏 ，张敏 ，胡晓玲 ，翟元芳 ，师如意

1.山西医科大学医学细胞生物学与遗传学教研室，山西 太原 030001；2.山西医科大学转化医学研究中心，山西 太原 030001；3.山西医科大学药理教研室，山西 太原 030001；4.山西医科大学人体解剖教研室，山西 太原 030001

食管癌是一种消化系统的恶性肿瘤，我国食管癌的主要组织学类型为食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）。ESCC死亡率居于第六位，发病率居于第七位，全球约一半的ESCC发生在中国［1-2］。食管癌早期缺乏特异性症状，且缺乏有效的治疗手段。临床数据表明，患者5年生存率为15%～20%［3］。S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）是E3泛素蛋白连接酶复合物SCF（Skpl-Cullin-F-box）的底物识别组件，可识别特定的磷酸化底物并介导泛素化和随后细胞调节因子的降解［4-6］，参与调节细胞周期进程，信号转导和转录［7］。在前列腺癌［8］、黑色素瘤［9］和乳腺癌［10］等癌症中，较高水平的 Skp2与肿瘤转移和较差的生存期有关［3，7，9，11］，而Skp2的下调则导致肿瘤的生长和转移受到抑制［1］。但目前尚无Skp2基因在ESCC中的功能研究，因此阐明其功能具有重要意义。

本研究选取Skp2表达较高的ESCC细胞系KYSE150、KYSE180进行Skp2-shRNA和阴性对照（negative control，NC）慢病毒的感染，对敲低前后的细胞进行增殖、侵袭、迁移的功能试验后，采用RT-qPCR法检测Skp2潜在下游靶基因P53、P300的变化情况。

1 材料与方法

1.1 细胞及病毒 KYSE180和KYSE150细胞株由山西医科大学食管癌发病机理及转化研究重点实验室保存，均用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；Skp2-shRNA和NC病毒由上海汉恒生物科技有限公司提供。

1.2 主要试剂及仪器 胎牛血清、DMSO购自美国Sigma公司；RPMI1640培养基购自美国Hyclone公司；……