丁 涛，江 梅，邵 帅，姜经航

0 引 言

宫腔粘连又被称为Asherman综合征，病理学认为子宫内膜纤维化参与宫腔粘连形成，有效降低子宫内膜纤维化程度，可能有助于治疗宫腔粘连的形成[1-3]，进而为因宫腔粘连导致不孕的患者带来福音。有研究指出二甲双胍能够通过抑制转化生长因子(transforming growth factor-β1, TGF-β1)、 Smad2/3和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)信号分子，从而抑制组织器官的纤维化以及肿瘤细胞的上皮间质转化[4]，使用二甲双胍能够抑制TGF-β1/Smad3信号通路改善肝纤维化程度[5]。同时在放射性肺炎中使用二甲双胍，抑制Smad2/3磷酸化降低肺纤维化[6]。同时有研究表明，在动物宫腔粘连模型中，TGF-β1参与宫腔粘连的形成[7]。但是目前关于二甲双胍用于预防和治疗宫腔粘连的研究较少。因此本研究通过对构建成功的宫腔粘连大鼠模型给予二甲双胍处理，探讨其对逆转子宫内膜纤维化的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与材料6～8周性成熟雌性大鼠40只，体重150～200 g；9～10周性成熟雄性大鼠20只，体重400～530 g。动物许可证号：SCXK2015-0018。普通级别，自然光线，24 h明暗交替，室温24～26 ℃，定期消毒。TGF-β1抗体、Smad-3抗体、MMP9抗体、Fibronectin抗体以及a-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin, a-SMA)抗体购于英国abcam公司，Trizol试剂购于美国Invitrogen公司，SYBR©Premix、逆转录试剂盒以及TGF-β1、Smad-3、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP9)、纤维粘连蛋白以及a-SMA基因引物购于日本公司大连Takara分公司。TGF-β1引物序列为上游: ATTCCTGGCGTTACCTTGG，下游: AGCCCTGTATTCCGTCTCCT；Smad3引物序列为上游: CGACCACCAGATGAACCACA，下游:GCTGTGAAGCGTGGAATGTCT；MMP9引物序列为上游: TTGACAGCGACAAGAAGTGG，下游:GCCATTCACGTCGTCCTTAT；Fibronectin引物序列为上游: TTGAGGAACATGGCTTTAGGC，下游: CTGGGAACATGACCGATTTG；a-SMA引物序列为上游: CCGAATGCAGAAGGAGATCA，下游: GTGGACAGAGAGGCCAGGAT；GAPDH引物序列为上游: CTGGGCTACACTGAGCACC，下游: AAGTGGTCGTTGAGGGCAATG。

1.2实验方法

1.2.1 实验分组成功构建大鼠宫腔粘连动物模型[9]。……