朱文雄，袁轶峰，孙弘本，刘 涛，陈其华，贺菊乔

(1. 湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2. 湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

少弱精症是引起男性不育的极为常见病因，但其发病机制仍不十分明确，临床缺少有效的治疗手段。近些年来，许多医家开始研究依靠中医辨证、采用中医方剂及相关中医制剂来治疗少弱精子症的方法，并取得了显著疗效[1-3]。调治天癸方是我院国家级名老中医贺菊乔教授以“肾-天癸-肾子轴”[4]为理论基础制定且经多年临床应用治疗少弱精症的验方，功可滋养肝肾，益气填精。本实验通过雷公藤多苷建立少弱精症大鼠模型，观察了调治天癸方对少弱精症大鼠精子质量及Fas表达的影响，旨在为该方的应用提供实验依据。

1 实验材料与方法

1.1实验动物 SPF级雄性SD大鼠，体质量300～330 g，由北京科宇动物养殖中心提供，动物许可证号：SCXK(京)2018-0010。

1.2实验药物 调治天癸方由黄芪15 g、黄精15 g、菟丝子15 g、枸杞子15 g、车前子10 g、熟地黄15 g、山茱萸10 g、紫河车9 g等组成，由湖南中医药大学第一附属医院中药房统一提供并熬制成药液。生精胶囊由遵义廖元和堂药业有限公司提供，国药准字Z20027672，规格：0.4 g/粒，产品批号：20170905。

1.3实验试剂 PMSF，Amresco生产，货号：329-98-6；羊抗鼠-HRP，Abmart生产，货号：M21001L；cocktail，上海源叶生产，货号：10557；溴酚蓝，Amresco生产，货号：BO449-5G；β-actin，杭州华安生产，货号：1854-s；三硫叔糖醇(DTT)，Biosharp生产，货号：Amresco0281；甘油，国药集团化学试剂有限公司生产，货号：10010618；SDS，国药集团化学试剂有限公司生产，货号：30166428；marker，TransGen Biotech生产，货号：DM111；PVDF膜(0.45 μm)，Millipore生产，货号：IPVH00010；ECL底物液，Thermo生产，货号：NCI5079；Beta-actin，abcam生产，货号：Ab8226。

1.4实验主要仪器 电泳仪，Tanon生产，型号：EPS300；……