丙泊酚对小鼠急性肺损伤NLRP3信号通路的影响
2021-02-24程向阳
符 炜,程向阳,刘 娣,刘 刚
脓毒败血症会导致病人发生急性肺损伤,继而引发重症监护室病人死亡风险增加[1-2]。丙泊酚对脓毒败血症诱发的急性肺损伤的保护作用已被证实[3],但其机制还未阐明。研究[4]显示,核苷酸结合结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症体参与急性肺损伤的形成和进展。氧化应激反应参与了急性肺损伤的形成和进展[5],硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)是关键的氧化应激衔接蛋白,TXNIP从硫氧还蛋白解离,结合NLRP3,激活NLRP3炎症体[6]。由于NLRP3具有促炎作用,抑制NLRP3能抑制炎症的形成和进展,而丙泊酚被认为主要通过抑制炎症反应发挥肺保护作用[3]。本研究观察抑制NLRP3信号通路对丙泊酚肺保护作用的影响,以探讨丙泊酚肺保护作用机制。现作报道。
1 材料与方法
1.1 实验动物 ICR小鼠40只,雄性,体质量20~24 g,由浙江省医科院实验动物中心提供,实验前适应性喂养1周,自由进食水。小鼠随机分为对照组(腹腔注射pH 7.4磷酸缓冲液)、脂多糖(LPS)组(腹腔注射30 mg/kg脂多糖)、丙泊酚组(静脉注射40 mg/kg丙泊酚)、丙泊酚+LPS组(腹腔注射30 mg/kg LPS前20 min预静脉注射40 mg/kg丙泊酚),各10只。腹腔注射48 h后在七氟烷麻醉下颈椎脱位法处死小鼠。
1.2 方法
1.2.1 病理学观察 制作小鼠肺组织石蜡切片,置于烘箱中60 ℃烤1~2 h,石蜡切片常规二甲苯、乙醇脱蜡至水,苏木素染10 min,流水冲洗,去余色,0.7%盐酸乙醇分化数秒,流水冲洗,切片变蓝约15 min,95%乙醇30 s,乙醇性伊红染30 s,95%乙醇30 s(2次),100%乙醇30 s(2次),石碳酸二甲苯(1∶4)30 s,二甲苯30 s,中性树胶封片。采用100倍光学显微镜对肺部组织进行观察,细胞染色呈棕色为阳性细胞。……
