胡晏宁，鲁炳怀

人体的呼吸道与外界相通，感染病原学类别非常复杂，涵盖细菌、真菌、病毒，甚至寄生虫的感染。下呼吸道感染(low respiratory tract infection，LRTI)是全球人类最常见的感染性疾病之一。呼吸道感染所致的肺炎是人群发病和死亡的重要原因，通常对老年和免疫力功能低下群体影响较大[1,2]。尽管有多种实验室诊断方法可用，但仍有约40%需要住院治疗的社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)患者的致病病原体难以确诊，所以实验室诊断的准确性和有效性的提高有重要意义[3]。包括培养在内的传统检测方法在改良的同时依然被认为是病原体检测的“金标准”，分子生物学诊断技术的发展在近年来广泛用于呼吸道病原体微生物学诊断[4～7]。

1 呼吸道感染病原体检测技术的发展及临床应用现状

1.1传统呼吸道病原体检测方法

1.1.1 涂片染色镜检法 (1)染色方法较多，常用的是革兰染色与抗酸染色。革兰染色可用于区分革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌，易于操作。有报道称球菌性肺炎病例检测中革兰染色法的灵敏度仅约80%[8]，特别是CAP人群的肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌的感染。抗酸染色可以突出显示纤细的染成红色的杆状菌，对分枝杆菌的诊断特异性很高(90%～100%)，但灵敏度有限[3,9,10]。其他染色法如墨汁染色法对隐球菌诊断特异性较高，特别适合脑脊液样本中隐球菌的染色，但是灵敏度差，应与隐球菌荚膜多糖抗原试验相结合。六胺银染色适合经典真菌、耶氏肺孢子菌的染色。对于真菌感染的痰与支气管肺泡灌洗液样本最常用的诊断方式是使用荧光素偶联单克隆抗体的荧光染色[3]。……