武振汝，陈梦琳，李 丽，石毓君，步 宏,2

组织芯片技术又称组织微阵列(tissue microarray, TMA)，是将数十至上百个小组织块按预先设计的阵列图排列在同一玻片上形成矩阵的微缩组织块。由Kononen等[1]首次提出，并证实了其实用价值。组织芯片具有体积小、易操作、信息量大等特点，该技术被广泛应用到临床和科学研究中。组织芯片有多种制作方法[2-4]，但鉴于设备昂贵，操作复杂，不易切片，掉片率高等问题未被推广使用。本科室在此基础上进行改进，总结出一种操作简便，成本低廉，切片简单，不易掉片，易于推广的组织芯片制作方法，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料选取四川大学华西医院生物样本库肝细胞癌、肝内胆管癌以及其对应的癌旁冷冻新鲜组织800例。

1.2 耗材与仪器石蜡(熔点58 ℃)、HE染液、显微防脱玻片、组织切片机(HM355S型)等，均购自美国Thermo Fisher公司；组织芯片仪(Quick-Ray，UNITMA，中国)；特尖头长嘴镊子(深圳上河科技公司)。

1.3 组织芯片制作步骤

1.3.1制备供体蜡块 冷冻新鲜组织用镊子从冻存管中取出，在组织未完全融化时用取材刀修整成大小2 cm×1.5 cm×0.3 cm的组织块，修整好的组织放入10%中性福尔马林中固定48 h后，按照常规方法脱水、浸蜡、包埋。包埋好的蜡块首先切片行HE染色，显微镜下观察HE染色结果，并圈出所需病变的位置，对应切片中圈出的位置，用记号笔在蜡块上轻轻标出穿刺点。

1.3.2制作工具准备和组织微阵列的设计 准备组织芯片制作使用的工具，骨髓穿刺针或机械组织芯片仪用于从供体蜡块上取组织柱，刀片用于修整组织柱，长尖镊用于夹取组织柱植入微阵列包埋模具(图1)。……