邢 杰，赵继开，丁闻洁，韩昱晨

PD-1/PD-L1通路已经在多种肿瘤中进行了广泛深入的研究，如黑色素瘤、结肠癌、肺癌、乳腺癌等，并且PD-1/PD-L1表达可能与恶性肿瘤的临床病理特征或不良预后相关[1-3]。近年来国内外关于胸腺瘤PD-1/PD-L1的研究较少，但均表明PD-L1表达与胸腺肿瘤(包括胸腺瘤和胸腺癌)的组织学类型、Masaoka分期以及疗效相关，并且能够提示肿瘤的恶性程度及预后[4-7]。常规PD-L1检测方法为免疫组化，但PD-L1在正常的胸腺上皮细胞及淋巴细胞中也有表达[8-9]，可能使得免疫组化染色结果判读困难，为解决这一问题，作者尝试采用p63+PD-L1免疫组化双重染色法对胸腺肿瘤进行染色，由于p63广泛表达于上皮源性肿瘤细胞胞核，p63+PD-L1免疫组化双重染色法能够更加清楚的判断胸腺源性上皮细胞的PD-L1阳性率。

1 材料与方法

1.1 材料收集上海市胸科医院病理科存档的胸腺肿瘤手术切除样本60例，其中B1、B2及B3型胸腺瘤各15例，胸腺癌15例，每例胸腺肿瘤连续切片3张，分别用于HE染色、PD-L1免疫组化染色、p63+PD-L1免疫组化双重染色。

1.2 染色方法标本均经10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，免疫组化染色采用Multimer法，染色平台为Dako Link 48全自动免疫组化染色平台，一抗PD-L1(22C3，1 ∶50，Dako公司)、p63(1 ∶300，上海长岛生物公司)，其他试剂均为Dako Autostainer Link48全自动免疫组化染色平台专用试剂，购自安捷伦科技(上海)公司。

1.3 结果判断将染色后的切片交由科内经过PD-L1判读专业训练的3名医师阅片，并根据判读的难易程度进行评分，评分内容包括染色效果、特异性着色部位及非特异性着色部位判断，然后进行综合评分，易于判读为Ⅰ级，判读难度一般为Ⅱ级，难以判读为Ⅲ级，3名医师分别就相应的切片进行分级，每个级别取3名医师打分的平均值。……