朱玲 强鑫华 嵇龙飞

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus，VP）是一种广泛分布在近海岸海水、海产品及腌制食品中的革兰染色阴性嗜盐杆菌，是引起食源性腹泻的重要病原菌之一，是沿海城市食物中毒和夏秋季腹泻疾病的主要病原菌［1］。有研究报道，由该菌引起的食物中毒占细菌性食物中毒的比例高达60%以上，居微生物性爆发病原的第一位［2］。自1996年首次爆发群体食物中毒事件以来［3］，VP的感染也升级为全球性公共卫生问题。VP在临床上主要是引起急性胃肠炎，另外还有伤口感染甚至菌血症。VP的毒力机制复杂，目前大量研究表明，主要是由多种毒力基因编码导致。另外，由于抗菌药物的不合理使用，VP对常规抗菌药的耐药率也在逐年升高［4］。本资料对湖州哨点医院肠道门诊来源的VP进行毒力基因（tdh、trh、tlh）检测，O、K血清分型以及抗生素耐药性试验，以了解本地区VP的流行特征，为临床和疾控防治提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 菌株 收集2015年1月至2019年12月本院肠道门诊就诊的腹泻患者，大便≥3次/d，粪便性状异常（呈稀便、水样便、黏脓便或脓血便等），每人留取粪便标本1份送本院微生物实验室，培养所得VP用甘油肉汤冻存于本院微生物室-80℃冰箱，共计170株，备用。

1.2 方法 （1）菌种鉴定：致病菌的检测方法菌株分离培养根据《浙江省食源性致病菌监测工作手册》进行，细菌菌种鉴定采用梅里埃公司VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定到种，仪器及配套试剂购自法国生物梅里埃公司。（2）毒力基因检测：采用热裂解法提取细菌DNA：挑取火柴头大小菌落溶于500μl灭菌水中，振荡10s，100℃金属浴10min，13,000r/min 4℃离心10min，上清液即为模板DNA。……