张军 朱海勇

脓毒症（sepsis）是由感染引起的全身性炎症反应综合征（SIRS），其发病机制复杂：包括病原微生物对组织器官的直接损伤和机体免疫功能紊乱等［1］，脓毒症导致各种炎性因子和炎性介质如肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素（IL）-6、C反应蛋白（CRP）等大量释放和活化，从而引起促炎因子和抗炎因子的平衡失调，机体免疫功能受到损伤。为了进一步深入研究脓毒症的发病机制和诊断、预后的新方法，越来越多的科学家开始将基因调控技术应用于脓毒症的研究，寻找脓毒症分子生物学靶标逐渐成为研究热点。微小RNA（microRNA，miRNA）是一类长度为20～25个核苷酸的非编码小RNA分子，在同源及不同源物种中具有高度一致性［2］。越来越多的研究显示miRNA的表达与脓毒症密切相关，不同miRNA在脓毒症中表达也不同［3］。其中miRNA-451已被证实与炎症的发生发展密切相关［4］。本研究通过盲肠结扎穿刺方法建立脓毒症大鼠模型，探究脓毒症大鼠血清中miR-451的表达情况及作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料 Trizol试剂（美国Invitrogen公司）；反转录试剂盒Prime Script RT Reagent Kit和SYBR PrimeScript miRNA RT-PCR Kit（日本 Takara公司）；miR-451模拟物、抑制剂和对照剂（广州锐博生物科技有限公司）；TNF-α、IL-6和CRP酶联免疫分析试剂盒（上海信然生物技术有限公司）。

1.2 实验方法 （1）盲肠结扎穿刺脓毒症大鼠模型建立及分组：清洁级SD大鼠45只，200～250g，购买于上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物生产许可证号为SCXK（沪）2013-0018。将大鼠随机分成3组，分别为正常对照组、假手术组、脓毒症组。其中正常对照组5只：正常饲养，不做任何处理；假手术组20只：大鼠麻醉后开腹，不做模型诱导处理；……