王艺璇，王馨悦，林贞花，孙 洁，杨 洋，金爱花

头颈鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)是指由口腔、口咽、喉部和下咽的鳞状上皮细胞形成的一组恶性侵袭性肿瘤[1]，其发病率占头颈部肿瘤总发病率的95%以上[2]。由于HNSCC发病的高隐匿性、高转移性以及缺乏有效的早期诊断标志物，患者的5年生存率仅40%～50%[3-4]。因此，探寻HNSCC的早期诊断标志物刻不容缓。人类羟基类固醇脱氢酶样蛋白2(hydroxysteroid dehydrogenase like 2, HSDL2)作为短链脱氢酶/还原酶(SDR)超家族中的成员之一，在乳腺癌[5]、甲状腺乳头样癌[6]、卵巢癌[7]和胃癌[8]等多种恶性肿瘤中异常表达且发挥重要作用。目前，关于HSDL2在HNSCC中的表达尚未见报道。本文旨在探讨HSDL2在HNSCC中的表达及临床意义，为筛选HNSCC的早期诊断标志物和药物治疗靶点提供可能的分子生物学指标。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1临床资料 组织芯片购自西安艾丽娜公司，包括61例HNSCC组织标本和11例癌旁正常组织标本。61例HNSCC中男性51例，女性10例；年龄<60岁者34例，≥60岁者27例；有淋巴结转移者19例，无淋巴结转移者42例；组织分化程度：高分化16例，中分化32例，低分化13例；临床分期：Ⅰ+Ⅱ期28例，Ⅲ+Ⅳ期33例。

1.1.2主要试剂 HSDL2抗体购自美国Proteintech公司(15631-1-AP)，免疫组化SP两步法试剂盒、柠檬酸缓冲液、PBS缓冲液、DAB显色剂和苏木精染料，均购自北京中杉金桥公司。

1.2 方法

1.2.1生信分析 应用UALCAN数据库(http://ualcan.path.uab.edu/index.html)[9]分析HNSCC组织和正常组织中HSDL2 mRNA的表达及其与临床病理特征的关系；应用HPA数据库(https://www. proteinatlas.org/)[10]分析HSDL2蛋白(抗体编号HPA050453)在HNSCC组织和癌旁正常组织中的表达水平及其与患者总生存期的关系；应用STRING数据库(https://string-db.org)[11]分析HSDL2的蛋白互作网络及其可能参与的生物学进程。

1.2.2免疫组化 采用免疫组化SP两步法检测HSDL2蛋白的表达水平，60 ℃烤片45 min，常规脱蜡，梯度乙醇水化，热柠檬酸盐缓冲液水浴30 min进行抗原修复，滴加一抗HSDL2(稀释浓度为1 ∶200)，4 ℃孵育过夜；……