童晔玲，任泽明，陈 璇，陈思思，朱佳依，戴关海

（浙江省中医药研究院，浙江省中药新药研发重点实验室，浙江 杭州 310007）

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中80%～85%为非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），其恶性程度高，生物学特性复杂，且预后差，缺少早期诊断及有效的治疗手段，5年生存率＜15%［1］。西医治疗NSCLC以手术、放化疗和靶向治疗为主。中医药治疗有其独特的优势，从中草药中筛选有效的、靶向性高的肿瘤防治药物是近年来的研究热点。

中药猫爪草（Ranunculus ternatus Thunb.）性温，味甘、辛，入肝、肺经，具有化痰散结、解毒消肿等功效，临床用于治疗瘰疬痰核、疔疮肿毒、蛇虫咬伤等［2］。近年来，猫爪草在中医临床上用于治疗肿瘤，对肺癌、淋巴癌、甲状腺瘤和乳腺肿瘤等均有较好的治疗效果。猫爪草总皂苷（total saponin of R.ternatus，TSRT）和多糖是其主要活性成分，对人胃癌BGC823细胞［3］、人乳腺癌MCF-7细胞［4］和肝癌H22细胞［5］等生长均有较好的抑制作用。本课题组前期研究发现，TSRT体外能较好地抑制人NSCLC A549和NCI-H460细胞的增殖，体内能有效抑制A549裸鼠移植瘤生长［6-8］，并通过高通量测序技术检测TSRT治疗NSCLC A549细胞的相关基因，筛选差异表达基因，结合GO功能分析、Pathway富集分析、荧光定量PCR验证，最终聚焦到信号素4D（semaphorin 4D，Sema4D）。本研究观察TSRT对Sema4D过表达慢病毒感染的A549细胞增殖的影响，并初步阐明其抗NSCLC的作用机制。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂和主要仪器

人NSCLC A549细胞，来源于中国科学院上海细胞库。RPMI 1640培养基、0.25%胰蛋白酶（含0.02% EDTA）和PBS购于吉诺生物医药技术有限公司；胎牛血清购于浙江天杭生物科技股份有限公司；……