槲皮素调控GSTP1甲基化抑制前列腺癌LNCap细胞增殖的机制研究
2021-01-18邢红宇朱明月
邢红宇,朱明月,李 伟,林 波
前列腺癌是多发生在40岁以上成人的一种恶性肿瘤,男性恶性肿瘤前列腺癌发病率明显升高,在新发现的确诊病例中大多为局部晚期或广泛转移患者,主要以手术治疗为主,化疗、放疗等其它疗法为辅,无法根治性治疗,预后较差[1-2]。谷胱甘肽S-转移酶P1(glutathione S-transferases pi-1,GSTP1)具有保护细胞DNA碱基不受伤,抗肿瘤等功能。GSTP1表达沉默是正常前列腺上皮转化为前列腺腺癌的标志[3]。槲皮素广泛分布于植物中,具有多种生物作用,如抗氧化、清除自由基、抗感染、抗菌、抗病毒、免疫调节等作用[4]。GSTP1基因启动子区Cp G岛甲基化是药物治疗前列腺癌的重要有效靶点。针对GSTP1的靶向治疗,探讨槲皮素对前列腺癌细胞(prostate cancer cells,LNCap)细胞GSTP1启动子甲基化的影响与LNCap细胞增殖机制的关系,为肿瘤靶向治疗提供临床医疗机制支持。
1 材料与方法
1.1 试剂及仪器酶标仪(型号: DG3022A)购自南京华东电子集团医疗装备有限责任公司;细胞培养箱(型号: J-80B-III)购自上海杰涵实验设备有限公司;蛋白印迹仪(型号: PROFIBLOT 48) 购自北京博宇腾辉科贸有限公司;流式细胞仪(货号: BeamCyte,1026)购自常州必达科生物科技有限公司;CCK-8试剂盒(货号:D190411)购自上海钰博生物科技有限公司;RNA提取试剂盒(批号:D1937)、反转录试剂盒(批号:D1932)、PCR检测试剂盒(批号:D1946) 购自哈尔滨经纬百科生物技术有限公司;RPMI-1640 培养基(批号:507739)购自美国GIBCO公司;胎牛血清(批号:11019-8634) 购自杭州亿枫生物公司; EZ DNA Methylation-Gold KitTM甲基化试剂盒(货号: D5005)购自北京天漠科技开发有限公司;膜联蛋白V(异硫氰酸荧光素碘化丙啶(fluorescein isothiocyanate propidium iodide,FITC /PI) 细胞凋亡检测试剂盒(货号: T2190)购自上海恒斐生物科技有限公司;……
