彭 芳，胡擎鹏

许多研究[1]表明，氧化应激参与了癫痫的病理生理过程，其中活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平的升高是癫痫诱发神经元损伤的主要原因。最近研究[2]表明，线粒体通透性转变孔(mitochondrial permeability transition pores，MPTP)开放后线粒体膜电位发生改变，促凋亡蛋白、抗凋亡蛋白和细胞色素C(Cytc)等蛋白释放进入细胞质，并启动caspase级联反应，最终导致神经元凋亡，提示线粒体可能在癫痫损伤中起重要作用；葛根素是从草药葛根中提取的一种黄酮类化合物，具有抗感染、抗氧化、抗凋亡等多种药理作用[3]。据研究[4]报道，葛根素对体外缺氧缺糖细胞和体内缺血性脑损伤具有神经保护作用。然而，葛根素对癫痫大鼠海马神经元损伤的影响尚不清楚，该研究旨在探讨葛根素能否减轻匹罗卡品诱发癫痫发作后海马神经元的凋亡以及可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料匹罗卡品购自美国 Sigma 公司；ROS测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所； 罗丹明123购自美国 Sigma公司；细胞凋亡检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；组织线粒体分离试剂盒购自北京普利莱基因技术有限公司；Bax(1 ∶500)、Bcl-2(1 ∶500)、Mito-CytC(1 ∶1 000)、Cyto-CytC(1 ∶1 000)、Cl-caspase3(1 ∶500)抗体购自英国Abcam公司。

1.2 动物及模型建立30只成年雄性Wistar大鼠，体质量250～300 g，购自南华大学实验动物中心[SCXK(湘)2016-0023]。所有大鼠均饲养在室温下并自由获取水和食物。实验经南华大学动物实验伦理委员会批准(编号：2019-105)。

给予Wistar大鼠腹腔注射氯化锂(127 mg/kg)，18～24 h后腹腔注射硫酸阿托品(1 mg/kg)，30 min后腹腔注射匹罗卡品(30 mg/kg)致癫痫。参考Racine规定标准，4～5级癫痫发作，被纳入实验组。癫痫持续60 min，然后注射安定(10 mg/kg，静脉注射)以降低死亡率。……