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APE-1对肝癌细胞裸鼠成瘤能力及PKM2表达的影响及机制探索

2021-01-18孙志鹏许光中阿民布和彭吉润张能维

安徽医科大学学报 2020年12期
关键词:肝癌检测

孙志鹏,许光中,阿民布和,樊 庆,彭吉润,张能维

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是原发性肝癌中最常见的肿瘤,目前主要治疗手段为手术治疗,且放化疗效果较差[1]。同大部分肿瘤一样,HCC的早期诊断和手术的比例仅10%~20%,大多数患者在诊断时已是晚期或终末期[2]。肝癌的发生由多种因素共同作用,通过多种途径引起,具体的发病机制尚不清楚。深入研究HCC的发病机制,寻找关键性的分子作为分子治疗的靶点,对于肝癌的治疗具有重要的意义。脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶-1(apurinic-apyrimidinic endonuclease 1,APE-1)是一种可以发挥DNA修复功能和氧化还原功能的蛋白,可调节肿瘤相关途径的多种转录因子[3]。前期基于细胞水平研究[4]发现APE-1在肝癌组织和细胞中高表达,且其高表达与TNM分期、组织病理分级存在差异,沉默APE-1表达可降低肝癌细胞Hep 3B的增殖活性,提高细胞凋亡率。该研究基于动物模型水平,进一步探究APE-1对肝癌细胞裸鼠成瘤能力的影响及机制探索。

1 材料与方法

1.1 组织样本及主要试剂

1.1.1实验动物及细胞 20只4周龄SPF级BALB/c品系雄性健康裸鼠,体质量17~18 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。在首都医科大学附属北京世纪坛医院(北京大学第九临床医学院)SPF级实验动物房饲养。所有饲料、水、空气、铺垫物及各种用品均需经过高温高压等灭菌处理。裸鼠处死取材后,用于免疫组化的样品保存于组织固定液中,用于Western blot的组织立即转入液氮保存。沉默APE-1表达的肝癌Hep 3B稳定细胞株及其对照由实验室构建后保存[4]。

1.1.2主要试剂 SP-0023-SP免疫组化检测试剂盒购自北京索莱宝公司;……

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