章孝成，丁 锐，张晓燕，韩毛振，黄升海,

乳糖不耐受症(lactose intolerance，LI)是由机体内乳糖酶缺乏所引起，症状为腹部不适、胀气、和腹泻等。LI是由于机体内乳糖酶缺乏而引起的腹部不适、胀气和腹泻等临床症状。目前LI是影响儿童营养不良、发育迟缓的重要疾病，全球许多人群面临不同程度的LI，严重影响人们的生活质量[1-2]。继发性乳糖不耐受(secondary lactose intolerance, SLI)是一种暂时性LI，常继发于肠道各种病毒或寄生虫感染性疾病、克罗恩病或放射性肠炎等，使肠绒毛受损伤而出现乳糖酶的缺乏，发生LI腹泻；待绒毛恢复能分泌足量乳糖酶后疾病有所恢复[3]。目前，SLI的发生机制研究并不完善，主要原因是缺乏相关的SLI动物模型。该文通过构建轮状病毒(rotavirus,RV)感染7日龄BALB/c乳鼠SLI模型，为SLI的研究提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 细胞株与病毒株恒河猴胚胎肾细胞MA104细胞株、轮状病毒VR-2018病毒株均购自武汉病毒研究所，课题组自行培养保存。病毒复苏后在MA104细胞上进行培养增殖，通过半数组织细胞感染剂量(median tissue culture infective dose，TCID50)测定感染剂量为10-4.51/0.1 ml后，用于灌胃感染乳鼠。

1.2 实验动物SPF级1～8周龄BALB/c小鼠36只，由安徽省实验动物中心提供，饲养于独立送风隔离笼具系统内，该系统由安徽医科大学基础医学院动物房提供，等级为P2级。待雌雄鼠自行配种生产乳鼠，随机选取150只7日龄BALB/c乳鼠，3.5 ～4.0 g/只。

1.3 主要试剂DMEM培养基购自美国Gibco公司(批号：1868817)；小牛血清购自芜湖天明生物技术有限公司(批号：C0257)；二甲基亚砜购自美国biosharp公司(批号：D5879)；乳糖酶试剂盒购自南京建成生物工程研究所公司(批号：A082-1)；……