赵红梅 刘圣勋 孙景云 安新业 纪 冰 彭新国

滨州医学院附属医院检验科 山东 滨州 256603

铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)是革兰氏染色阴性需氧杆菌，也称绿脓杆菌，主要存在于人体呼吸道、肠道、皮肤及空气、水、土壤和自然界中，是一种常见的条件致病菌[1]。近年来由于广谱抗菌药物的广泛使用、医院感染的暴发流行，导致产生了对多种临床药物耐药[2]，甚至全耐药的铜绿假单胞菌(MDR-PAE)。PA感染科室来源主要有重症监护病区、呼吸内科以及烧伤科病房。我院是一所集医疗、教学、科研、康复和急救于一体的三级甲等综合医院，省级区域医疗中心，对PA分布及耐药性情况调查有一定的代表性。本文采用回顾性分析方法，对2019年1—12月我院住院患者分离出的422株PA的标本类型、送检科室进行统计，分析我院PA的临床分布和耐药性，以期能为有效预防和治疗PA感染提供临床依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 收集2019年我院临床标本中分离的422株PA菌，剔除同一患者相同部位的同一菌株。

1.2 仪器和试剂 梅里埃基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)；梅里埃Vitek2 Compact 全自动微生物分析仪(法国)；N335药敏板购自法国梅里埃公司。所用M-H琼脂、培养平板均为济南百博生物有限公司产品。

1.3 分离和鉴定 参照《全国检验操作规程》(第4 版)[3]的要求进行培养、分离和鉴定. 采用法国生物梅里埃MALDI-TOF-MS行细菌鉴定。标准菌株质控大肠埃希氏菌(ATCC 25922)和铜绿假单胞菌(ATCC 27853)均来自于国家卫生健康委临床检验中心。

1.4 药物敏感性试验 采用K-B纸片扩散法和Vitek2 Compact 全自动微生物分析仪进行药敏试验。药物敏感性(简称药敏)试验选用15种临床常用的抗菌药物，包括：哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、多粘菌素。药敏纸片为英国Oxoid公司产品，药敏折点标准依据美国临床和实验室标准协会(CLSI)2018版抗微生物药物敏感性试验的执行标准进行判读。

1.5 统计学方法 采用Whonet 5.6专业统计学软件进行数据分析，数据以百分比表示。

2 结果

2.1 标本来源分布 2019年422株PA标本来源前三位的分别为痰液(71.1%)、脓液(7.3%)和肺泡灌洗液(5.2%)，见表1。

表1 铜绿假单胞菌的来源分布

2.2 科室分布 标本主要科室分布以重症医学科最多(19.9%)，其次为呼吸内科(17.10%)和胸外科(8.5%)，见表2。

表2 铜绿假单胞菌的科室分布

2.3 PA对常用抗菌药物的耐药性 2019年PA对阿米卡星耐药率最低，为0.2%；对多粘菌素B，妥布霉素等药物耐药率较低，分别为0.3%和1.7%；而对替卡西林/克拉维酸的耐药率达17.7%，见表3。

表3 铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率

3 讨论

本研究显示2019年我院422株PA主要分布于重症医学科，其次为呼吸内科。感染科室主要来自于重症医学科，患者大多数处于昏迷状态，因存在各种潜在因素导致免疫力下降，且治疗过程中常使用各种有创医疗器械，从而使重症医学科成为PA感染的重要场所[4-5]。第三位为胸外科病房，说明患者因接受有创操作和抗生素使用强度高而PA的发生率较高[6]。标本主要来源于痰液，与王志勤，刑志广，廖卫等报道相符[7]，其次是脓液和肺泡灌洗液，说明PA主要引起下呼吸道感染。

PA是一种临床上最常见的引起严重院内获得性感染的条件致病菌，临床常用竣基及酞胺类青霉素，第三、四代头抱菌素和碳青霉烯类抗生素治疗PA感染，抗菌药物的不合理使用会导致多重耐药铜绿假单胞菌所致感染日益增多[8-9]。PA对常用抗菌药物显示出不同的耐药状况，2019年我院分离的PA对阿米卡星耐药率最低(0.2%)，其次为多粘菌素(0.3%)，2019年监测的PA对15种抗菌药物的耐药率均为20%以下[1]。

碳青霉烯类抗生素抗菌谱较广，2019年我院监测的碳青霉烯类药物如亚胺培南、美洛培南耐药率分别为8.7%、2.9%，均低于陈云等[10]研究的PA的耐药率。但以往数据显示，PA对美罗培南和亚胺培南的耐药率与碳青霉烯类抗菌药物的使用量成正相关[11]，虽与我院监测结果存在一定差异性，仍需加强抗菌药物的规范化管理，降低PA的耐药率。我院PA对喹诺酮类药物如左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率分别为13.2%、15.9%，虽耐药率低于20%，但与监测的其他抗菌药物的耐药率相比相对较高，临床需谨慎使用；而对哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低为3.3%，充分说明加酶抑制剂的抗菌药物对PA的治疗效果较好。对氨基糖苷类药物阿米卡星耐药率最低，临床可以选用，但应警惕阿米卡星存在耳毒性、肾毒性等不良反应，临床应警惕选用[12]，可以用于多重耐药菌的治疗。对于头孢菌素类药物如三代头孢头孢吡肟的耐药率为3.1%，低于林雅宁等[13]所报道的PA的耐药率，说明不同地区，不同医院PA对头孢菌素类药物的耐药率存在差异。

综上所述，PA耐药性与膜通透性改变、酶对抗生素修饰或破坏、新靶位改变或产生、细菌主动外排抗生素、生物被膜形成等有关，其耐药机制极其复杂,通常是多种机制综合作用易产生多重耐药。故临床应合理使用抗菌药物，加强细菌耐药率监测，降低细菌耐药率发生[14]。