陈叶 王波伦 张爱君

（南京市雨花台区妇幼保健所 江苏 南京 210000）

目前维生素D 基因多态性与钙缺乏相关的研究较多，但具体的基因位点尚有争论，且针对婴幼儿的研究较少，而婴幼儿又是钙缺乏的高发人群，可导致活动性佝偻病，低钙惊厥、生长迟缓、萎靡、易激惹、易发生呼吸道感染等。本研究从婴儿入手，研究维生素D 基因多态性与钙缺乏的关系，为儿童的营养保健指导提供依据。

1.资料和方法

1.1 一般资料

随机选取2016 年1—6 月在南京市雨花台区妇幼保健所进行系统管理的6 月龄婴儿115 例(其中女婴56 例，男婴59 例)，均无服用骨代谢药物，无影响骨代谢的遗传、代谢疾病史者。

1.2 方法

1.2.1 体格检查 身长、体重：穿单衣单裤，脱鞋袜，扣除尿不湿等重量，连测3 次取平均值并计算BMI。

1.2.2 25(OH)D3检测 常规采末梢血，统一采用英国IDS 公司试剂盒检测25(OH)D3浓度。

1.2.3 BMD 测定 使用以色列Sunlight 公司Ominisense7000P型检测仪进行骨密度测量。以婴儿左侧胫骨中段为测量点，测量Z 值。

1.2.4 VDR 等位基因测定(收集口腔黏膜细胞，邮寄至上海解码DNA 公司检测)PCR 反应步骤：基因组DNA 200ng、Dntp 200umol/L、MgCl21.5mmol/L、引物0.5umol/L、Taq plus(Taq+Pfu)DNA 聚合酶2.5U 和1×Taq plus DNA 聚合酶缓冲液，加水至终体积50uL；PCR 反应程序为95℃预变性5min 之后，95℃变性40s，分别68℃、58℃、60℃退火40s，72℃延伸40s，循环30 圈，最后72℃延伸7min。同时设阴性对照。分别用限制性内切酶ApaI、BsmI、FokI 进行酶切。ApaI、BsmI 酶切产物用2%的琼脂糖胶电泳，FokI 酶切产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳。于ZF-A2 型紫外透射分析仪下观察酶切结果。

1.3 统计学方法

使用SPSS20.0 软件对研究数据进行统计学分析，计量资料用（±s）表示；两组间数据比较采用独立样本t 检验，组间对比采用多元素协方差分析，用Levene 检验检测误差方差齐性，检验水准采取α=0.05（双侧），P ＜0.05 差异有统计学意义。……