李文娣 吴雷琪 黄全忠

动脉粥样硬化(atherosclerosis， As)是机体对血管内皮细胞损伤的一种慢性反应[1]，As 的发病机制与氧化应激损伤、血脂代谢紊乱、炎症反应等密切相关[2]。 AS 损伤的各时期均存在细胞凋亡，而斑块中凋亡的细胞包括血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells， VSMCs)。 VSMCs 是血管壁的主要成分，其结构和功能的异常可导致成熟AS 斑块不稳定以及心脑血管疾病的发生发展[3-4]，而VSMCs 的过度增殖和凋亡是造成动AS 发生病变的关键因素。

白皮杉醇(piceatannol，PCT)是一种具有较强抗氧化活性的多酚物质，可以清除自由基，提高机体免疫力[5]。 有研究证实，PCT 还具有抑制炎症反应与抵抗细胞凋亡的作用[6]，并且能够抑制肿瘤细胞的生长，降低癌症的发生率[7-8]。 而关于白皮杉醇在抑制AS 进展及预防介入治疗心血管疾病的研究却不多。 本文以过氧化氢(hydrogen peroxide， H2O2)为凋亡诱导剂，观察白皮杉醇对H2O2诱导的VSMCs 凋亡的影响及相关凋亡蛋白的表达变化，探讨其抗凋亡机制。

材料与方法

1.动物 健康，雄性Sprague-Dailey 大鼠，15只，体质量平均(100±10)g，购于北京生命科学研究所，动物许可证号:SYXK(京)2018-0022。

2.试剂 白皮杉醇(PCT，＞98%)，DMEM，FBS和MTT 购于美国Sigma 公司，兔抗Bcl-2、Bax、caspase-3、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS、

鼠抗β-actin、山羊抗鼠IgG、山羊抗兔IgG 等抗体以及Bio-Rad 试剂盒购于美国Millipore 公司，LDH 测定试剂盒，超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒，Annexin V/PI 凋亡试剂盒和Hoechst 33258 均购于碧云天生物技术研究所。 其他试剂为进口分装或国产分析纯。

3.VSMCs 获取与培养 摘取健康雄性SD 大鼠胸主动脉血管，除去血管中粘连的结缔组织和脂肪组织，刮取血管中膜，将其剪成约1 mm×1 mm 组织块，贴于培养瓶内，于37 ℃，5% CO2条件下用含20% FBS 的DMEM 培养液进行培养，培养液每3 d更换1 次。……