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重组酶等温扩增技术在分析检测中的应用研究进展

2021-01-04孙晓红后来旺李达容赵勇黄新新何宇平蓝蔚青

食品与发酵工业 2020年24期
关键词:检测

孙晓红,后来旺,李达容,赵勇,黄新新,何宇平,蓝蔚青,3*

1(上海海洋大学 食品学院,上海, 201306)2(农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室,上海, 201306) 3(上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海, 210306)4(上海海关动植物与食品检验检疫技术中心,上海, 200135)

微生物污染是引起食物中毒和动植物病疫的主因之一,国家标准检测方法主要通过传统培养结合生理生化鉴定,其检测过程一般需要3~6 d,不但耗时耗力,且对技术条件要求较高,无法满足政府与企业倡导的快速简便需求,开发新型快速检测技术成为当务之急。快速检测技术相对传统培养法和依赖仪器检测而言,其最大特点是简便快速,不依赖精密仪器的辅助,检测时间短等。目前常用的快速检测方法有化学比色法、酶抑制技术、分子生物学检测技术与生物芯片技术等。其中,分子生物学检测技术以其灵敏度高、漏检率低、窗口期检测时间短等优点在常规快速检测技术中占明显优势,其主要通过“核酸提取-扩增-检测”三步操作对核酸分子的精确鉴定,从而提供各类风险源以及疫病检出的相关信息,为其预防、监控和治疗提供有效依据。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)自20世纪80年代引入以来,已作为分子生物学研究的重要手段,广泛应用于生命科学和环境科学等领域中[1-2]。然而,由于PCR技术及其衍生技术均存在对温控设备的依赖性高、热循环过程耗时与操作专业化等特点,其应用范围受限;而与之相比,重组酶等温扩增技术只需温度调控,无需特殊仪器辅助,易于实现扩增和现场检测。……

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