张洪科

（贵州省盘州市人民医院医学检验科, 贵州 盘州）

0 引言

分子技术在当前医疗技术不断发展的大形势下也得到了很大的发展，分子技术被广泛用于微生物检验工作中，使我们可以从RNA、DNA中检验到病原微生物，对患者所患的疾病进行及时、有效地诊断，提高诊断准确率，以确保患者及早接受治疗。PCR技术的应用，可以快速诊断病毒基因，对病原微生物进行准确地鉴别，同时其也可以用在诊断肿瘤疾病中。核酸探针技术应用于病原菌的检测中[1]，具有如下优势：时间段、速度快、准确性高、敏感性高等，应用生物芯片技术可以对待检产品进行检测，信息量与其他两种技术相比更大。常规的微生物检验技术的检验根据就是依靠微生物的状态来进行检验，但是对待相同种类的微生物，不管是生理生化性状还是形态，都是存在一定的差异性的，由此，常规的微生物检验技术所得到的检测结果受到显著影响，常常不能得到准确的检验结果。而应用分子技术进行检验就具有较多的优势，主要为：检测速度快、操作简单、效率高、可靠性高[2]，逐渐在临床上得到广泛应用，并受到人们的一致好评。下面我就对PCR技术、核酸探针技术、生物芯片技术以及其他的分子技术进行分析探讨。

1 PCR 技术

PCR技术指的是一种扩增DNA的技术，这种技术能够大幅度的增加微量的DNA，只要有少量的DNA通过应用PCR技术就能将其扩大几倍，由此，PCR技术目前被广泛应用在凶杀案的检测中。1985年，聚合酶链反应首次被人们发现，这就是PCR技术的前身，PCR技术应用区域比较广泛，随着时代的发展，其发展速度也较快，相关人员对PCR技术进行了延伸，将聚合酶链反应的特性和原理不断进行深入挖掘，并且通过多年研究，将其不断完善，到目前为止，PCR技术被广泛应用在检测病原微生物工作中。但是，PCR技术也不是完美的，其也存在一些缺点，那就是其对于一些形成引物二聚体、产生假阳性、存在RNA的检测，操作起来是相对复杂的，因此，研究人员也PCR技术进行了不断改造与完善，研发出新型的PCR技术，比如：巢式PCR技术、热启动PCR技术等。

2 核酸探针技术

核酸探针指的是带有标记的具有特异性的DNA片段，其是以固定为工作原则，使其与目的基因实施杂交，并且应用特定的方法对标记物实施测定操作[3]，目前在临床上比较常见的探针标记方法主要为放射性标记、非放射性标记，而非放射性标记的应用较为常见且广泛，原因是这种方法更加直观并且准确，检测指标一般包括产肠毒素大肠杆菌、乙型肝炎病毒等。

临床微生物检验应用到核酸探针技术主要包括这几种：

2.1 流行病学的调查研究，区分有毒与无毒的菌株。

2.2 通过生化鉴定无效、不能够培养、诊断抗原缺失的病原体通过该技术检测。

2.3 细菌间的抗药基因通过应用该技术进行检测[4]。

2.4 病毒病病人，例如免疫性缺陷病毒、肝炎病毒等病人应用该技术进行检测。

2.5 食品是否被耐药菌株感染通过该技术进行检测。

3 生物芯片技术

生物芯片技术属于一种比较新颖的检测技术，其是将多种尖端技术进行融合，主要包括微电子学、生物学、计算机科学等高端技术，生物芯片技术是将玻片作为载体[5]，将生物活性分子作为排列序列，然后经过一系列的排列组合，从而实现对多种疾病进行检测的目的。此种检测技术的准确性较高，在临床上广泛用于病原菌的检测过程中。

生物芯片作为现代社会的高端技术，呈现为较多的优势，主要为：通过生物芯片对病原菌进行检测，得到的结果具有较高的准确性，应用连续检测方法对多种疾病进行检测，操作简单，快速省时，对于基因序列的分析、病原微生物的诊断、病原菌的详细情况均能够准确反映，另外，通过生物芯片技术的应用，可以对抗体产生之前的感染情况实施检测，由此能够在短时间内检测出是否出现了感染情况，基因芯片还可以对病原体的种类进行检测。随着时代的发展，科学技术的不断进步，我们相信，生物芯片也会逐渐优化，总有一天应用此项技术能够将所有的病原菌都检测出来[6]。

4 其他种类的分子技术

随着科技的不断发展，各种各样的分子技术被研究出来，主要有DNA分子标记技术、高效液相色谱法、气相色谱法等分子技术，在进行微生物检验的时候就可以根据实际情况选择最佳的分子技术加以应用，大大提高了检验准确率和工作效率。在目前形势下，分子技术的主要发展方向就是高度自动化、高度灵敏性等，将各个技术应用于多个区域当中，与多种学科相融合，将检验范围不断扩大，对分子技术进行不断更新，其应用在临床微生物的检验也变得越来越广泛了。

5 讨论

在微生物检验过程中应用分子技术是十分重要的，目前的分子技术种类在不断增多，其中各有其优缺点[7]，而我们在对微生物检测的时候，也可以对分子技术进行合理选择，选择最为合适的分子技术进行操作，再将所有的检测结果进行比较，从生理生化角度将菌株进行系统的鉴定，确认菌株的种类，对病原菌的类型进行准确判断，通过分子技术能够快速、准确的检测微生物，意义重大[8]。