李立军

一、材料与方法

1.材料

经染色体计数鉴定为二倍体与四倍体的菘蓝无性系组培苗。

2.菘蓝组培苗的培养

取已经染色体鉴定确定为二倍体与四倍体的菘蓝无性系组培苗，接种于生根培养基中。培养基成分为：1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L，并附加不同浓度的NaCl作为处理。NaCl浓度梯度为0、2、4、6、8、10g/L。每处理接种 6 瓶，每瓶 3 棵，重复3次。组培苗于温度25±0.2℃，光照强度1500～2500Lx条件下进行培养。培养条件为温度（25±0.2）℃，光照强度2500lx。

3.试验方法

（1）二倍体菘蓝和四倍体菘蓝的外部形态特征观察

对胁迫后的二倍体菘蓝和四倍体菘蓝进行生长和植株形态的观察。

（2）二倍体菘蓝和四倍体菘蓝叶绿素含量的测定

采用浸提法测定不同倍性菘蓝叶绿素的含量，重复3次。

（3）电导率的测定

使用电导率仪进行测定。相对电导率（L）=S1/S2;S1—初电导率;S2—终电导率。

（4）游离脯氨酸含量的测定

采用茚三酮比色法进行测定。

脯氨酸含量计算：

从标准曲线中查询出测定液中脯氨酸浓度，按下式计算样品中脯氨酸含量的百分数。

脯氨酸[ug·g-1（干或鲜重）]=（C·V）·（a·W）-1

式中：C—提取液中脯氨酸浓度（ug），由标准曲线求得;

V—提取液总体积（ml）;

a—测定时所吸取的体积（ml）;

W—样品重（g）;

（5）可溶性糖含量的测定

采用蒽酮比色法进行测定。

（6）植株相对含水量（RWC） 的测定--干鲜重称量法

相对含水量采用烘干称重法测定：取鲜叶称重，然后在105℃下烘30min杀青后在80℃烘干到恒重。 RWC%=（鲜重-干重）/鲜重×100%

二、结论

1.NaCl胁迫对二、四倍体菘蓝生长及植株形态的影响

二倍体与四倍体菘蓝接种于含不同浓度的培养基中，观察NaCl胁迫对其生长及植株形态的影响。……