谭文佳，杨照微，刘金华，孙志霞*

(吉林大学中日联谊医院 1.超声科;2.检验科，吉林 长春130033)

肾癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤，发病率逐年增加[1,2]。synemin(SYNM)是Ⅳ型中间丝蛋白，具有调节细胞运动、粘附和迁移的功能[3,4]，该蛋白质广泛表达于哺乳动物的中胚层和外胚层的收缩性细胞[5]。在Ⅳ级星形细胞瘤患者中高表达[6,7]，在肝癌[8]、结直肠癌[9]、乳腺癌[10,11]组织中低表达。

蛋白质组学技术广泛的应用于化学和医学领域，尤其是在对癌症的研究中，对我们进一步了解癌症的形成和发展具有重大意义[12]。本研究的目的是寻找肾癌组织和癌旁组织的差异蛋白，探索synemin蛋白成为肾癌生物标志物的可能性。利用液相色谱-质谱法鉴定肾癌和癌旁组织差异表达的蛋白，采用免疫组织化学的方法验证肾癌标本中synemin蛋白的差异表达。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选择90例TNM Ⅲ期肾透明细胞癌患者。收集样本包括：术中获得新鲜的肾癌和配对的癌旁组织。PBS冲洗样本，液氮中保存。

1.2 试剂与仪器

蛋白质提取试剂盒、蛋白定量试剂盒、PBS粉剂购自美国赛默飞公司。二甲苯购自北京化工厂。LTQ XL 离子阱质谱仪购自美国赛默飞公司。电泳仪、电泳槽购自柏奥易杰北京科技有限公司。电子天平购自德国Mettler Toledo 公司。

1.3 实验方法

1.3.1提取样品总蛋白、测定蛋白浓度 从样本库中随机选取30例病理明确诊断为TNM Ⅲ期肾透明细胞癌患者的癌组织及癌旁组织标本随机分组(每组10例，共分为三组)。在实验条件不变的情况下，对三组样本进行3次重复实验。……