李宗源，吴耀祖，刘晶劼，刘羽阳，王丽强

1解放军总医院第一医学中心 眼科，北京 100853；2解放军总医院研究生院，北京 100853；3清华大学医学院，北京 100084

角膜内皮细胞(corneal endothelial cell，CECs)起源于神经外胚层，是一层紧密连接组成的单层六边形细胞，附着在角膜后弹力层上，通过Na+-K+- ATP酶和Mg2+- ATP酶主动将角膜基质中的水泵入前房中，在维持角膜脱水状态和透明中起到重要作用。出生时，人类角膜内皮层细胞密度约为5 000/mm2，由于角膜内皮细胞在体内存在有丝分裂抑制，因此CECs随年龄增长细胞密度呈下降趋势。从妊娠中期到10岁之间，细胞密度呈快速的非线性下降趋势，这可能与角膜面积增大、细胞老化和细胞凋亡相关。之后的阶段细胞密度每年以0.6%的速度递减。当角膜损伤、角膜内皮疾病或自然衰老导致细胞密度小于500/mm2时，角膜内皮将失去其泵水功能，从而导致角膜基质水肿、角膜混浊，最终导致视力下降[1]。包括板层角膜移植、穿透性角膜移植、角膜内皮移植在内的角膜移植是一种可靠的治疗方式[2-3]。但角膜供体移植物在世界范围紧缺，工程化角膜移植材料是解决这一问题的新途径。在种子细胞的获取方式上，体外扩增CECs是一种潜在的解决方案。但内皮细胞在体外扩增时内皮间质转化(endothelium mesenchymal transition，EnMT)和细胞衰老制约着这一策略的可行性。近年有研究指出，物理参数如机械硬度可调节细胞EnMT程度。因此我们推测，生物工程底物能够模拟后弹力层的物理机械特性，从而降低CECs细胞体外扩增时的EnMT过程[4]。本研究通过底物对兔角膜内皮生长的影响，旨在改进角膜内皮细胞体外扩增质量，提供工程化角膜内皮材料所需要的种子细胞，为生物工程内皮材料治疗大泡性角膜病变提供前景。……