娄海伟 余颖豪 林俊芳 郭丽琼* 叶志伟 李 艳 魏 韬 云 帆

（1 华南农业大学食品学院生物工程系 广州510642 2 河南工业大学粮油食品学院 郑州 450001 3 广东省微生态制剂工程技术研究中心 广州510642 4 广州市澳键丰泽生物科技股份有限公司 广州510760）

蛹虫草（Cordyceps militaris）是一种重要的食药两用真菌， 它具有和冬虫夏草相似的药用价值和活性成分[1]，被广泛作为冬虫夏草的替代品。 蛹虫草含有虫草素[2]、虫草酸[3]、虫草多糖[4]等生物活性成分，具有免疫调节[5]、抗疲劳[6]、抗肿瘤[7]等活性，已成为研究的热点。随着菌体中喷司他丁等抗癌化合物的发现[8]， 蛹虫草的市场需求量逐渐增大。虽然蛹虫草的人工栽培技术已推广应用，但产量仍无法满足日益增长的市场需求， 其主要原因是价格较高的菌体中生物活性成分含量低。 基因工程是提高蛹虫草生物活性成分的有效方法，然而大多数与生物活性成分合成相关的基因的功能仍然未知， 主要是因为蛹虫草具有一层较厚且致密的细胞壁，这给基因工程操作中载体DNA 的转化带来很大困难。目前，蛹虫草遗传转化的方法主要有农杆菌介导转化法[9]、基因枪法[10]、聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）介导的原生质体转化法[11]。 相对于基因枪法，PEG 介导原生质体转化法设备条件要求低，方法简单。相对于农杆菌介导转化法，PEG 介导转化原生质体法试验周期短。 另外， 通过原生质体融合亦可选育高产生物活性成分的优良蛹虫草菌株[12]。 原生质体的制备是实现蛹虫草原生质体转化和原生质体融合的技术关键。……