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STK17A基因经TGF-β/SMAD信号通路调控宫颈癌细胞增殖凋亡及侵袭的机制研究

2020-04-13刘海霞戴淑凤

中国免疫学杂志 2020年6期
关键词:检测

刘海霞 宋 梅 戴淑凤

(青岛市第三人民医院,青岛 266041)

宫颈癌是当前世界范围内女性发病率第二的肿瘤,持续感染高危型人类乳头瘤病毒是引起该病的主要原因[1,2]。巴氏涂片以及液基薄层细胞学检查(thinprep cytology test,TCT)是近年来宫颈癌筛查的一种低成本且操作简便的筛查手段[3]。尽管宫颈癌诊断和治疗手段不断改进,但是晚期宫颈癌患者的5年生存率仍然很低,因此,对宫颈癌进展的潜在分子机制进行研究并且提供有效的治疗方法十分重要。丝氨酸/苏氨酸激酶17A (serine/threonine kinase 17A,STK17A)是死亡相关蛋白家族(death-associatedprotein,DAP)中的一员且DAP家族中成员被证实在多种癌症中的表达受到限制,同时与多个细胞凋亡和自噬相关通路有关[4-6]。近年来关于STK17A在胶质母瘤、大肠癌、睾丸癌等癌症进展中的研究也被逐渐发现[7-9]。但是关于其在宫颈癌中的作用尚不明确。转化生长因子β (transforming growth factor beta,TGF-β)/SMAD通路是癌变过程中的重要调节通路,研究证实其在宫颈鳞癌中被激活[10]。在前人研究基础上,本研究旨在明确STK17A在宫颈癌中的价值并探讨其具体作用途径。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1材料与试剂 pcDNA3.1(+)质粒购自Invitrogen;基因组DNA提取试剂盒、Lipofectamine 3000试剂盒、总RNA提取试剂盒、TransScriptⅡGreen One-Step qRT-PCR SuperMix试剂盒、CCK-8试剂盒购自赛默飞世尔;人子宫颈上皮细胞及Hela、SiHa和C-33A宫颈鳞癌细胞系购自拜力生物;TGF-β/SMAD通路抑制剂SB-431542购自美国Selleck;苏木素染液、伊红染液、DAB染液购自北京索莱宝;Western blot中所有抗体购自ABCAM;RIPA细胞裂解液;Matrigel胶、Transwell小室购自上海复申生物科技有限公司;Anexin-V-FITC染液、PI染液购自锐赛生物;BD FACSCALIBUR 流式细胞仪德国贝克曼;倒置显微镜购自奥林巴斯;……

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