瞿晓林 李莹姗 吴皓玄 曾 豪 李宗英 龚政华

湖南中医药高等专科学校，湖南省株洲市 412012

冠状动脉缺血引起的缺血性心脏病，是心血管系统疾病的主要死亡原因。随着人口老龄化和生活方式的改变，缺血性心脏病的发病率不断上升，是心血管疾病死亡的重要原因，是严重危害人民健康的常见病，也是中国成年人心脏病住院和死亡的第1位原因，其发病率和死亡率依然呈上升趋势[1]。

在临床上，治疗缺血性心脏病的方法有药物治疗、手术治疗、针灸治疗等。周玮等[2]通过针刺膻中、膈俞、心俞、内关等穴观察针刺对冠心病、心绞痛的临床疗效，结果发现针刺膻中等穴位对治疗冠心病心绞痛有较好的临床疗效。内关穴是八脉交汇穴之一，通于阴维脉，属于手厥阴心包经的络穴，与心脏密切相关。主治心痛、胸闷、心悸、心烦、癫狂等病症。长期以来内关穴一直是治疗胸痹的首选穴。现代医学也证实内关穴对心血管系统有特异的生理效应和治疗作用[3]。膻中穴，心包募穴，八会穴之气会，属于任脉。在胸部，当前正中线上，平第4肋间隙，两乳头连线的中点，连于心系，主治咳嗽、气喘、胸痹、胸痛等。《千金方》日:“胸痹心痛，灸膻中百壮”[4]。

相关文献证明膻中穴对胸痹有一定的防治作用，但使用不同频率电针刺激内关穴配伍膻中穴对家兔急性心肌缺血模型影响的研究很少，特别是从生理功能方法的角度观察的较少。本研究尝试在实验性急性心肌缺血的动物模型上，采用生理功能的方法，观察不同频率电针预处理膻中、内关穴对家兔急性心肌缺血时心脏功能活动的影响，分析其是否对家兔急性心肌缺血有保护作用。

1 材料与方法

1.1 主要仪器及药品 BL-420F生物机能实验系统、PT-100生物血压传感器、HX-101E小动物呼吸机(成都泰盟有限公司生产)、DS-781SS防水电子秤(上海勤酬实业有限公司)、达佳牌G6805-D六路输出电针仪(广州康迈医疗器械有限公司)，华佗牌无菌针灸针0.35mm×25mm毫针(苏州医疗用品厂有限公司)，批号170410。氨基甲酸乙酯(上海展云化工有限公司)批号171015，0.9%氯化钠注射液(安徽双鹤药业有限责任公司)批号171110，肝素钠注射液(天津生物化学制药有限公司)批号180301，75%乙醇(山东利尔康医疗器械有限公司)批号171210。

1.2 实验动物及分组 由湖南株洲种养殖有限公司提供的健康成年新西兰兔40只，雌兔20只，雄兔20只，体重2.0～2.5kg。将心电图异常者剔除，心电图正常者在动物饲养房饲养7d后即开始实验。各组家兔饲养于同等条件下：室内温度(25±1)℃，相对湿度(55±5)%，自由进食、饮水。按照《卫生统计学》随机数字表随机将家兔分五组，分别是空白对照组、模型对照组、高频组(100Hz)、中频组(50Hz)、低频组(2Hz)，每组8只。

1.3 取穴及针刺方法 空白对照组和模型对照组不进行电针膻中、内关穴的预处理，高、中、低频组每天上午9时左右分别给予100Hz、50Hz、2Hz电针膻中、内关穴，电压均为3V，40min/次，共14d。参照华兴邦等制定的实验动物穴位图谱取穴，内关穴位于兔前肢腹面的尺骨与桡骨之间，距腕关节约1.2cm处，膻中穴在兔胸部，前正中线平对第4肋间隙。将家兔仰卧于手术台上，内关穴及膻中穴均用消毒后的毫针直刺0.2～0.3cm。将电针仪负极接内关穴及膻中穴，正极接内踝，可见家兔肢体与电针频率一致的颤动。

1.4 测量左心室收缩压、左心室舒张末压及心肌缺血模型制备方法 除空白对照组外，模型对照组、低频组、中频组及高频组的家兔均制备心肌缺血模型，其中低频组、中频组及高频组家兔均在最后一次电针2h后制备心肌缺血模型，模型对照组同时间段制备心肌缺血模型。心肌缺血模型制备方法：捉取新西兰兔，称重，根据体重由耳缘静脉注射30%氨基甲酸乙酯溶液3ml/kg麻醉并仰卧位固定为手术台上。将BL-420F系统中的心电图白色电极线插入兔右上肢皮下，红色电极线插入左下肢皮下，黑色电极线插入右下肢皮下，记录Ⅱ导联心电图。气管及左心室插管，切开家兔颈部正中皮肤、筋膜、肌肉层做一4cm左右切口，分离一侧颈总动脉和气管，气管切开并插管，插管末端连接小动物呼吸机，呼吸比为5∶4。颈总动脉插管内注满肝素钠溶液，外涂抹石蜡油以润滑插管，通过颈动脉缓缓插入左心室，边插边观察血压曲线，曲线突然变宽变大，且最小值接近0mmHg(1mmHg=0.133kPa)时说明导管进入左心室。心肌缺血模型制备，在家兔胸部左侧第3肋间隙开胸,剪开心包膜，找到冠状动脉的左心室支，下方穿一零号手术丝线并扎结,阻断冠状动脉血液，造成相应心肌组织缺血，以心电图T波高耸及ST段移位为模型复制成功。

1.5 观察指标 观察不同频率电针预处理“膻中”“内关”穴对家兔急性心肌缺血时心率、左心室收缩压、左心室舒张末压在10s、1min、5min、10min、30min时间段的变化，并比较组间差异。

1.6 统计学方法 所得数据用SPSS18.0统计软件进行分析处理，计量资料以均数±标准差表示。各组间均数比较用单因素方差分析,组间均数的两两比较用LSD法,P<0.05时差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同频率电针预处理“膻中”“内关”穴对急性心肌缺血家兔心率的影响 制备心肌缺血病理模型后，各组家兔在10s、1min、5min、10min、30min时间段心率的变化，其中模型对照组家兔心率均下降，说明心脏功能受损，低频电针组与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示低频电针预处理对心率无显著改善作用。中频、高频电针组与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，提示中频、高频电针预处理对心率有显著改善作用。见表1。

表1不同频率电针“膻中”“内关”穴对家兔急性心肌缺血心率的影响次/min)

注：*与正常组比较，P<0.05；△与模型组比较,P<0.05。

2.2 不同频率电针预处理“膻中”“内关”穴对急性心肌缺血家兔左心室收缩压的影响 制备心肌缺血病理模型后，各组家兔在10s、1min、5min、10min、30min时间段左心室收缩压的变化，其中模型对照组家兔左心室收缩压均下降，说明心脏收缩功能受损，低频电针组与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示低频电针预处理对左心室收缩压无显著改善作用。中频、高频电针组与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，提示中频、高频电针预处理对左心室收缩压有显著改善作用。见表2。

表2不同频率电针预处理“膻中”“内关”穴对家兔急性心肌缺血左心室收缩压的影响

注：*与正常组比较，P<0.05；△与模型组比较，P<0.05。

2.3 不同频率电针预处理“膻中”“内关”穴对急性心肌缺血家兔左心室舒张末压的影响 制备心肌缺血病理模型后，各组家兔在10s、1min、5min、10min、30min时间段左心室舒张末压的变化，其中模型对照组家兔左心室舒张末压均升高，说明心脏舒张功能受损，低频、中频组与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示低频、中频电针预处理对左心室舒张末压无显著改善作用。高频电针组与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，提示高频电针预处理对左心室舒张末压有显著改善作用。见表3。

表3不同频率电针预处理“膻中”“内关”穴对急性心肌缺血家兔左心室舒张末压的影响

注：*与正常组比较，P<0.05；△与模型组比较，P<0.05。

3 讨论

冠心病是中老年常见病、多发病之一,随着年龄增加、生活方式的改变等,发病率越来越高,严重危害着人民的健康。冠状动脉疾病如动脉粥样硬化、冠状动脉痉挛等导致冠状脉供给心脏血液减少或中断，使其相应血管所支配部位的心肌缺血、坏死，进而使心脏功能下降、主要使血流动力学发生变化，如心率减慢、左心室收缩压降低、左心室舒张末压上升，这些都提示心脏收缩射血功能的下降。近年来,采用针灸等非药物疗法治疗本病取得较好的效果,针刺心包经内关穴区等,可明显改善缺血心脏的电活动和机械活动[5]。孙世晓等[6]研究表明电针内关穴可以改善PPI诱导家兔心脏泵血功能。本实验在家兔急性心肌缺血的模型上，观察不同频率电针预处理膻中、内关穴对家兔心功能活动的影响，即心率、左心室收缩压及左心室舒张末压的变化，观察不同频率电针预处理膻中、内关穴对其是否有保护作用。研究结果表明，不同频率电针预处理膻中、内关穴对家兔急性心肌缺血时心脏功能活动的影响有改善作用。其中高频电针预处理膻中、内关穴能改善心脏收缩和舒张功能状态，中频电针预处理对心脏收缩功能有改善作用，对心脏舒张功能改善作用不明显，低频电针预处理对心脏收缩、舒张功能影响均不明显。因此，中频、高频电针预处理膻中、内关穴对家兔急性心肌缺血时心脏功能活动有改善作用，尤以高频电针预处理改善作用更显著。这也与临床针灸在预防和治疗急性心肌缺血的研究中得到了肯定[7]的临床结果一致，为电针预处理膻中、内关穴防治冠心病心绞痛提供更为丰富的实验室依据，并为进一步的研究奠定基础。