吴合亮 李美辰 潘靖丹 邵薪诺 李世昌 王一诺 杜娈英

承德医学院，河北省承德市 067000

肺癌是全世界死亡率最高的恶性肿瘤，非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌总数80%～85%。在过去十年中，由于人口老龄化、吸烟、环境污染(厨房油烟、煤炭燃烧、汽车尾气)等因素，其死亡率有所上升[1-2]。然而大多数肺癌只有在晚期才能明确诊断，5年生存率低于15%，预后较差[3-4]。以铂类为基础的标准化疗方案仍是晚期肺癌主要治疗方法，但有明显的不良反应，且易复发[5-6]。相比之下，生物疗法被认为是一种安全、有效的治疗方法。已有研究表明，旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白体外作用于某些肿瘤细胞能使其增殖受到抑制，并能诱导肿瘤细胞发生凋亡[7]。本研究以人非小细胞肺癌A549细胞作为研究对象，观察了旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对A549细胞增殖的影响。

1 材料与方法

1.1 旋毛虫、实验动物和细胞株 实验所用旋毛虫为猪源旋毛虫，由本教研室保种。实验动物为清洁型健康成年昆明小鼠，体重18～32g，购自承德医学院动物实验中心。人非小细胞肺癌A549细胞株购自上海北诺生物科技有限公司。

1.2 实验试剂 MTT、二甲基亚砜(DMSO)、BCA蛋白浓度测定试剂盒均购自上海索莱宝生物科技有限责任公司；RPMI1640培养基、胎牛血清、胰蛋白酶消化液(0.25%)购自美国Gibco公司；氯化钠购自天津市百世化工有限责任公司。

1.3 旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白的制备及定量 体外提取旋毛虫肌幼虫，经过纯水多次洗涤沉淀后，用4%的明胶作为佐剂，对旋毛虫进行计数，调整虫体密度约为3 000条/ml,每只小鼠经口灌服0.1ml含旋毛虫肌幼虫的明胶，保虫35d后，采用颈椎离断法处死，去其四肢、内脏、脂肪等。……