APP下载

基于微滴式和芯片式数字PCR技术的转基因克螟稻成分的定量检测

2019-05-21邓婷婷黄文胜葛毅强

食品科学 2019年8期

邓婷婷,黄文胜,葛毅强*,陈 颖,*

(1.中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083;2.中国检验检疫科学研究院,北京 100176;3.科技部中国农村技术开发中心,北京 100045)

随着转基因作物种植面积的日益扩大和着转基因食品飞速发展,许多国家都出台转基因标识标签制度,欧盟、韩国及日本的转基因标识阈值(质量分数)分别为0.9%、3.0%、5.0%[1-3],我国自2002年起实施《农业转基因生物标识管理办法》[4],明确规定在中国境内销售农业部许可并列入标识的转基因生物及其产品,必须进行转基因成分的标识。随着全世界标识制度的完善和定量标识制度的发展,建立转基因产品的检测技术尤其是精准定量检测技术将越来越重要。

目前国内外针对转基因成分定量分析最常用的方法是实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法,该技术依靠不同浓度的标准样品建立标准曲线对未知模板进行定量分析,已比较成熟地用于转基因定值当中[5-8]。我国也发布了多项基于实时荧光PCR技术的转基因作物定量检测标准方法[9-10],其定量灵敏度在0.5%~0.1%之间。但是,实时荧光PCR技术用作定量时由于每次进行检测操作都需同时进行已知浓度标准品的扩增并制作标准曲线,校准品和样品间背景的不同及PCR扩增效率等因素都引入了偏差,导致其定量结果往往与实际值相差甚远[11-12]。此外,低拷贝数的目标DNA分子很难通过扩增检测到[13-15],因此在实际应用中局限性较多。

数字PCR是近年来发展起来的单分子DNA绝对定量检测技……

登录APP查看全文