薛继华，谢琴秀，程君，尹华发，叶英，李家斌

(安徽医科大学第一附属医院，合肥230022)

急性重型肝炎以肝功能的严重恶化为特征，起病急，进展迅速，病死率高。急性重型肝炎可由病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、乙醇及毒物等因素导致，在中国最常见的原因是病毒性肝炎。除了病情发展迅猛外，急性重型肝炎难防难治的另一原因是主导肝炎早期发展的关键分子不明确，缺乏特异、有效的治疗靶点和干预手段。刀豆蛋白(Con A)诱导的小鼠肝炎在很多方面较好地模拟了人类急性重型肝炎过程，如肝细胞大面积变性坏死、肝组织内淋巴细胞浸润、T细胞与NK细胞的激活及多种细胞因子水平升高等。前期研究中我们采用此法构建急性重型肝炎模型，利用芯片技术筛选表达受Con A影响的基因，结果发现1 473个基因表达差异明显[1,2]，糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)是其中之一，其配体为GITRL[3]。GITR高表达于调节性T细胞(Treg)表面，与GITRL相互作用能消除Treg的免疫抑制作用。有研究证实大黄素可抑制乙型肝炎病毒(HBV)复制[4,5]。我们既往研究证实大黄素可对抗Con A诱导的急性重型肝炎[6]。2016年7月～2018年6月，本研究观察了大黄素对Con A诱导小鼠急性肝损伤的干预作用，并借GITR/GITRL信号通路探讨其相关机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与主要材料 健康清洁级雄性6～8周龄Balb/C小鼠24只，体质量18～22 g，由浙江中医药大学实验动物中心提供。Con A购自Sigma公司；TRIzol购自Invitrogen公司；定量PCR试剂SYBR Premix Ex TaqTM(Perfect Real Time)及反转录试剂盒PrimeScript RT reagent Kitwith gDNA Eraser(Perfect Real Time)均购自TaKaRa公司；anti-GITR及anti-GITRL购自Abcam公司；匀浆机购自Bertin Technologies公司；电泳仪购自Bio-Rad公司；……