曾 兵 郭海霞 徐清榜 张晓旻 郭莉莉 万 野

集落刺激因子1 受体(CSF-1R)是免疫系统中最主要的调节因子之一，由原癌基因c-fms 编码而产生。通过调节单核-吞噬谱系细胞的生成与生物活性来影响肿瘤的进一步发展。在体内，CSF-1 通过结合CSF-1R 后自身磷酸化，并激活其磷酸化激酶域。与此同时，配体、受体结合形成二聚体形式。然后，效应蛋白的酪氨酸残基磷酸化，引起巨噬细胞活化。被激活的单核巨噬细胞系统可以通过许多途径促进肿瘤的发展，例如促进肿瘤生长、促进肿瘤新生血管生成、促进肿瘤细胞外基质分解以及促进肿瘤细胞的侵袭和转移。此外，CSF-1/CSF-1R 也直接影响肿瘤细胞的生长。目前，已有多种研究表明，CSF-1/CSF-1R 在各种恶性肿瘤中高表达[1～3]。但遗憾的是，目前仍没有CSF-1 /CSF-1R 是否影响鼻咽癌进展的相关报道。本研究通过实时荧光定量PCR 及Western blot法从细胞实验层面探讨CSF-1R 在鼻咽癌细胞中的表达对细胞增殖、凋亡、侵袭转移能力的影响。笔者希望能为鼻咽癌的诊断及预后找到一个新的预测指标以及可能成为鼻咽癌患者的治疗新靶点。

对象与方法

1.对象：(1)细胞：5-8F、6-10B 鼻咽癌细胞株及NP69 永生化正常鼻咽上皮细胞株购自APTT细胞库，CNE-2 鼻咽癌细胞株由笔者医院实验中心惠赠。5-8F、6-10B、CNE-2 鼻咽癌细胞株使用RPMI1640 培养基混合10%胎牛血清于37℃，5%CO2培养箱中培养。NP69鼻咽上皮细胞株使用加入0.05mg/ml BPE 和5ng/ml EGF 的 K-SFM 培养基于37℃，5%CO2培养箱中培养。(2)主要试剂：CSF-1R 兔抗人单克隆抗体(ab61137)购自英国Abcam公司；鼠抗兔多克隆即用型二抗购自中杉金桥公司；免疫组化试剂盒购自中杉金桥公司；……