龚勇泉， 曹健斌， 韦成信， 李富骊， 黄维佳， 何凌云， 农巍， 伍义文， 罗鹏

柳州市人民医院心胸血管外科(广西柳州 545003)

研究不同途径注射骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)后该细胞在器官移植受体内的分布和存活规律，有利于合理应用该细胞调节器官移植免疫排斥反应，在临床上有重要的意义。我们前期的研究发现，BMSCs能减轻心脏移植排斥反应，动脉途径注射BMSCs比静脉注射途径能更加显著延长移植心脏的存活时间，我们分析原因可能是BMSCs在体内的分布不同所致。对此， 2016年1—6月，我们进行了本研究课题，研究了BMSCs不同途径注射后在器官移植受体内的分布，我们将体外培养的绿色荧光(enhanced green flurorescent protein, eGFP)BMSCs(eGFP-BMSCs)，经移植心脏物右心室腔内、升主动脉两种途径注射到小鼠体内，对比观察了细胞在心脏移植受体内心脏移植物、肺脏以及肝脏分布和存活规律，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁级近交系C57小鼠，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，共48只(n=48)，周龄6～8周，体重16～24 g。eGFP转基因C57小鼠购于南京大学-南京生物医药研究院。实验中动物的使用严格遵守柳州市人民医院实验动物使用管理规定。

1.2 eGFP-BMSCs的培养 雄性eGFP-C57小鼠，断颈处死，无菌条件下取出股骨和胫骨，去除周围附着的软组织，将骨头移入干净的盛有2%FBS-PBS培养皿中，并放置于冰上。分别切除股骨和胫骨的两端，用2%FBS-PBS反复冲洗骨髓腔直至冲洗液颜色苍白，收集冲洗液，70 μm滤网过滤，1 200 r/min离心5 min，弃上清，小心吹打制成细胞悬液，细胞计数后，2×106个接种于10 cm培养皿中，加……