黄少江，阎吕军，牛凯，李青

(陆军军医大学第二附属医院，重庆400037)

结直肠癌是消化道常见的肿瘤之一，目前手术切除是治疗结直肠癌最有效的方式，然而只有少数早期结直肠癌患者才能采用根除手术治疗[1]，且手术后的肿瘤复发率仍较高，5年生存率很低[2]。研究证实，在结直肠癌的发生发展中存在多种基因和其编码蛋白的改变，越来越多的证据显示长链非编码RNA(LncRNA)的异常表达在结直肠癌的发生、迁移和侵袭中有重要作用[3, 4]。LncRNAs是一种长度大于200个核酸的RNA，能够识别互补序列，在RNA的转录后加工过程中有重要的意义，这些转录后加工的过程包括剪切、编辑、转运、翻译以及降解[5]。研究[6, 7]显示，LncRNA 牛磺酸上调基因1(TUG1)在胃癌、肝癌、乳腺癌、膀胱癌等多种肿瘤中发挥调控作用。也有研究[8, 9]显示,TUG1在结直肠癌中明显高表达并影响结直肠癌上皮间质转化过程，然而其具体作用机制尚未完全明确。本研究首先观察了LncRNA TUG1在结直肠癌细胞中的表达水平，然后探讨了干扰其表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂 结直肠癌细胞系SW480、HCT-116、SW620和LoVo细胞和正常结肠上皮细胞系FHC细胞购自中国科学院上海细胞生物研究所。RPMI1640和L-15细胞培养基、Lipofectamine 2000(Invitrogen公司)；FBS(Sigma-Aldrich公司)；总RNA提取试剂盒(Takara公司)；RNA反转录试剂盒、SYBR Green、荧光试剂、引物(Qiagen公司)；兔抗细胞转化生长因子-β(TGF-β)、细胞内信号转导蛋白2(Smad2)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)(Cell Signaling公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养、分组与siRNA-TUG1转染 SW480、SW620和LoVo细胞采用含10%胎牛血清的L-15细胞培养基培养；HCT-116和FHC细胞采用含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养基培养；……