李岩，张德巍，杨大业

（中国医科大学附属第四医院第三普通外科，沈阳 110032）

肺癌是发病率和死亡率均高的恶性肿瘤，我国由于人口老龄化加剧、环境恶化以及人们不良生活习惯增加，肺癌发病率和死亡率呈明显上升趋势［1-2］。目前肺癌治疗仍然存在着治愈率低、复发转移率高等缺点，需要寻找可以延长患者生存期，同时减轻化疗药物不良反应的治疗方法。

那可丁是来自罂粟属植物鸦片中的一种异喹啉类生物碱，近几十年一直用作镇咳药，其代谢物归属、生物利用度和药物动力学都已得到了较深入的研究。近年来，那可丁及其衍生物的抗肿瘤作用得到了广泛而系统研究［3］，它们具有抗肿瘤活性高、作用机制独特、不良反应小等特点。体外增殖实验［4-5］结果表明，不同肿瘤细胞株对那可丁的敏感性不同，IC50值为10～50 μ mol/L，对于一些耐药肿瘤细胞也有明显的疗效。那可丁同样具有体内抗肿瘤活性，且对多种肿瘤细胞有效［6］。本研究以人肺癌细胞系A549作为研究对象，探讨那可丁对A549细胞生物学功能的影响，以期待寻找更好可以作为治疗肺癌的潜在化疗药物。

1 材料与方法

1.1 材料

人肺癌细胞系A549 （实验室冻存） ，DMEM培养基 （美国Hyclone公司） ，胎牛血清 （杭州四季青公司） ，那可丁 （江苏豪森公司） ，四甲基偶氮唑蓝 （北京中杉金桥公司），DMSO （美国Sigma公司） ，Hoechst 33258、台盼蓝 （上海碧云天公司） ，Cyclin D1、BCL-2、MMP2和GAPDH抗体 （美国Santa公司） ，实验所需二抗购于北京中杉金桥公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养：将A549细胞接种于含体积分数10%灭活胎牛血清的DMEM培养基中，置37 ℃、体积分数5%CO2培养箱中培养。……