罗 磊薛依涵杨永庆朱文学

(1. 河南科技大学食品与生物工程学院，河南 洛阳 471023；2. 洛阳牡丹生物科技研究院，河南 洛阳 471023)

牡丹花蕊为牡丹(Paeonia suffruticosa Andr)的组成部分，呈黄色小石榴状，含有丰富的碳水化合物、蛋白质、不饱和脂肪酸、氨基酸和维生素等营养成分[1]，丹凤牡丹于2013年被中国国家计生委列为一种新食品原料。作为种子植物产生花粉的器官，牡丹花蕊具有降血脂、降血糖和抗氧化等功效[2]。但是作为牡丹资源大国，中国对牡丹花蕊的研究主要集中在营养成分分析和产品开发上[3-4]，缺乏对牡丹花蕊中有效成分的提取纯化和化学结构的深入研究。

三相分离法是通过在粗提物中加入一定比例的有机溶剂和盐而使体系分成明显的三相，即色素、脂质和疏水物质集中的上层相，蛋白质和细胞质集中的中间层，糖类等极性成分集中的下层相[5-8]。三相分离法应用了传统盐析、共溶剂、等离子体和蛋白质渗透沉淀等多种原理[9-10]，最近几年才被用到多糖的分离纯化当中。Yan等[11]采用三相分离法对河蚌多糖进行了分离纯化，得到良好的纯化效果。

本试验拟采用三相分离法纯化牡丹花蕊多糖，并对所得多糖的理化性质进行分析，为三相分离体系在多糖纯化方面的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 材料与试剂

新鲜牡丹花蕊：丹凤，采自洛阳牡丹园；

叔丁醇、硫酸铵、无水乙醇、盐酸、氢氧化钠、乙二胺四乙酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、乙腈、牛血清蛋白、考马斯亮蓝G-250、苯酚、硫酸、溴化钾、氘代水等：分析纯。……