◎ 陈强胜

（怀宁县市场监督管理局稽查大队，安徽 怀宁 246100）

黄曲霉毒素B1是黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的二次代谢产物，毒性强，分布范围广，在很多食品中普遍存在，对人类健康的危害性极大。采用高效液相色谱-柱后衍生法对黄曲霉毒素B1有很好的检测效果。高效液相色谱法是近年来发展起来的一种检测方法，其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离，再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前，该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离，其净化效果优异。

本文主要采用高效液相色谱-柱后衍生法检测大米样品中的黄曲霉毒素B1，用乙腈-水溶液的混合溶液提取，提取液经免疫亲和柱净化和富集，净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱分离，柱后（碘试剂衍生），经荧光检测器检测，外标法定量。

1 试剂和材料

甲醇（CH3OH），色谱纯；乙腈（CH3CN），色谱纯；氯化钠（NaCI）；磷酸氢二钠（Na2HPO4）；磷酸二氢钾（KH2PO4）；氯化钾（KCI）；盐酸（HCI）；TritonX-100；碘衍生使用试剂，碘（I2）；AFT B1标准品（C17H12O6，CAS号：1162-65-8），纯度≥98%，经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

2 仪器

高效液相色谱仪，日本岛津LC-20A，配有柱后衍生系统和荧光检测器。

3 测定条件

流动相：A相，水；B相，乙腈-甲醇（50+50）。低压梯度洗脱条件：A，55%；B，45%。色谱柱，C18柱（4.6 mm×250 mm×5 μm）；流速，1.0 mL/min；柱温，40 ℃；进样量，40 μL；衍生溶液，0.05%碘溶液；衍生溶液流速，0.2 mL/min；衍生反应管温度，70 ℃；激发波长，360 nm；发射波长，440 nm[1]。

4 分析步骤

按照国标GB 5009.22-2016方法和黄曲霉毒素B1免疫亲和柱说明书处理大米样品。……