◎ 林 川，何永姑，王小兵2,

（1.海南大学，海南 海口 570228；2.海南省农业学校，海南 海口 571100；3.海南临高海丰养殖发展有限公司，海南 海口 570206）

1 材料与方法

1.1 试验材料

卵形鲳鲹商品鱼取自临高海丰养殖发展有限公司临高后水湾抗风浪网箱养殖基地，该鱼苗为同一时间放养，不同规格在不同时间段采样测定。

硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、硼酸、氢氧化钠、石油醚、三氟乙酸、正庚烷、氢氧化钠、浓盐酸和异硫氰酸苯酯等，分析纯，国药；甲醇、醋酸钠、三乙胺、乙腈等，色谱纯，国药；17种氨基酸酸混合标准品、脂肪酸混合标准品，sigma公司。

1.2 仪器和设备

自动凯氏定氮仪、高温消解炉、索氏提取器、电热鼓风干燥箱、岛津GC-2014CT气相色谱仪，日本岛津公司；SOXTECTM 2055脂肪测定仪；HH-4数显恒温水浴锅，国华电器有限公司；Agilent 1260色谱仪，美国Agilent公司。

1.3 实验方法

1.3.1 蛋白质和脂肪测定方法

蛋白质测定采用GB 5009.5-2010《食品安全国家标准食品中蛋白质的测定》凯氏定氮法，脂肪采用GB/T 5009.6-2003《食品中脂肪的测定》索氏抽提法。

1.3.2 氨基酸测定方法

氨基酸测定采用GB/T 5009.124-2003《食品中氨基酸的测定》。

①色谱条件：流动相A，乙腈-0.1 mol/L乙酸钠溶液（V乙腈∶V乙酸钠=3∶97），乙酸调节pH至6.5；流动相B，乙腈-水（V乙腈∶V水=4∶1）。色谱柱：C18（4.6 mm×250 mm×5 μm）。流速为1.0 mL/min，柱温40 ℃，检测波长为254 nm。②洗脱梯度如下：时间0 min，流动相A 100%；时间14 min，流动相A 85%，流动相B 15%；时间29 min，流动相A 66%，流动相B 34%；时间30 min，流动相B 100%；时间37 min，流动相B 100%；时间37.1 min，流动相A 100；时间45 min，流动相A 100%。

1.3.3 脂肪酸测定方法

脂肪酸测定按照GB/T 22223-2008《食品中总脂肪、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸的测定、水解提取-气相色谱法》进行样品前处理，采用气相色谱-质谱联 用 法（Gas Chromatography - Mass Spectrometry，GC-MS）进行定性分析。……