胡 娜,吴鑫颖,*,邱树毅,*,王 艳,唐佳代

(1.贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳 550025;2.贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳 550025)

单宁酶(EC3.1.1.20)是一种细胞膜结合酶,能够水解单宁中的酯键和缩酚羧键,生成葡萄糖、没食子酸[1],该酶应用广泛,主要应用于精细化工、皮革、饲料、制药、食品饮料等领域[2]。能够产生单宁酶的微生物来源十分丰富,主要是真菌类的曲霉属、青霉属和根霉属等,尤其是曲霉属中的黑曲霉、米曲霉和黄曲霉[3]。其中由于黑曲霉具有生长迅速、发酵周期短等优点,而使得目前研究较多较深入的是黑曲霉[4]。

贵州是茶生产与消费大省,茶树的发源地之一。在茶叶生产过程中,会产生大量的废弃茶末,既污染环境，又造成生物资源的巨大浪费。茶末浸提液主要化学成分是茶多酚、氨基酸、黄酮化合物、酯型儿茶素、蛋白质、茶多糖、果胶质和咖啡碱等[5],于是考虑将茶末浸提液作为培养基供微生物利用。本实验创新性地利用废弃茶末浸提液作为发酵培养基,对黑曲霉B1401产单宁酶的发酵条件进行优化,以提高单宁酶酶活，为废弃茶末的利用提供新思路和理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

黑曲霉B1401 贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室保藏;废弃茶末 贵州省遵义市湄潭县某茶厂;氢氧化钠、蔗糖、尿素、可溶性淀粉、硫酸镁、磷酸氢二钾、硝酸钠、硫酸铵、单宁酸、没食子酸、氯化钠、柠檬酸、柠檬酸钠、绕丹宁、没食子酸丙酯、钼酸……