张昕　任文君

摘 要：为探讨不同持续时间有氧训练对大鼠骨骼肌和血清中NO生成的影响及分子机制，随机把40只雄性SD大鼠分为4组（n=10）：对照组、2周训练组、4周训练组和6周训練组，采用Griess法测定股四头肌和血清NO含量，采用试剂盒测定总一氧化氮合酶（NOS）活性和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性，采用实时定量PCR测定各型一氧化氮合酶及microRNA-24的表达。结果表明：与对照组相比，随着运动时间的增加，实验组骨骼肌和血清中NO含量明显增加，差异显著（P<0.05，P<0.01），在训练第4周达到最大，并且不随训练时间延长而增加；有氧训练后，股四头肌microRNA-24的表达水平显著升高；有氧训练引起cNOS的活性和eNOS mRNA的表达均显著升高（P<0.05，P<0.01），而iNOS的变化不显著。可以认为：有氧运动可通过上调microRNA-24的水平，上调eNOS的表达和活性，从而增加NO生成量。这可能是有氧运动调节eNOS表达的机制之一。

关键词：有氧训练；骨骼肌；NO；NOS；miR-24

中图分类号：G 804.2 学科代码：040302 文献标识码：A

Abstract：To elucidate the effects of aerobic exercise on the production of NO and the mechanism that regulate the expression of NOS，40 male SD rats were separated into control group and training group for 2 weeks， training group for 4 weeks，training group for 6 weeks，n=10. The levels of NO in quadriceps and serum were detected by Griess method，and the activity of NOS in quadriceps was detected by nitrix oxide synthase detection kit，the expression of different types of NOs and microRNA-24 was detected by RT-qPCR. Results： To compare with control group，NO production was elevated significantly in both quadriceps and serum in aerobic exercise groups（p<0.05， p<0.01）and approach the peak point after 4 weeke exercise，and maintained in the same levels even suatained exercise for longer time. Both total NOS and cNOS activity were enhanced in quadriceps，but aerobic exercise had no effects on the activity of iNOS. Aerobic exercise significantly increased the expression of eNOS and microRNA-24（p<0.05， p<0.01）. To sum up，aerobic exercise elevates the production of NO by upregulating the expression of eNOS. In addition，aerobic exercise down-regualtes the expression of microRNA-24， which maybe the reason why aerobic exercise can enhance the activity of eNOS.

Keywords：aerobic training；skeletal muscle； nitric oxide； nitric oxide synthase；miR-24

一氧化氮（NO）是在一氧化氮合酶（NOS）的催化作用下，由L-精氨酸与活性氧分子作用而产生的活性分子。NO 可激活鸟苷酸环化酶，参与血管平滑肌的舒张、抑制血小板凝集、神经传导、炎症反应等多种生理过程[1]。近年来，NO在骨骼肌功能中的作用也受到越来越多的重视。目前已经发现，NO可以通过调节肌肉供氧速度、营养物质可用度、神经体液因素等参与调节骨骼肌的运动功能[2] 。大量研究显示：运动训练，特别是有氧训练，可显著促进骨骼肌产生NO[2]。虽然有氧运动可促进骨骼肌产生NO这些现象已被广泛证实，但是这一现象的分子机制仍不十分清楚，而揭示有氧运动上调NO生成的机制对于建立更科学的运动训练方法、阐明适量运动在医学中的作用很有意义。

microRNA（miRNA）是长约21～25个核苷酸的单链小RNA，它通过与mRNA的3-UTR区结合来抑制mRNA的翻译或者促进其降解，从而负性调控基因的表达[3]。miRNA广泛存在于各种生物体中，它们通常在进化上是保守的，在细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤发生等多种生物过程中起作用[3]。……