钙敏感受体在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用
2018-08-08王勤章申茂磊郝志强
李 朋,王勤章,钱 成,徐 浩,申茂磊,郝志强,钱 彪
石河子大学医学院第一附属医院 泌尿外科,新疆石河子 832000
泌尿系结石是泌尿外科最常见的疾病之一,其中肾结石比较多见,但肾结石的形成机制和发病原因目前仍未完全明确。肾部位的结石主要为草酸钙等含钙结石[1-2],有研究表明钙的代谢异常是导致含钙尿路结石形成的重要因素之一,高钙尿引起尿液相对过饱和诱发了含钙结石的形成[3]。钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)会使肾小管髓袢升支粗段钙的重吸收受到抑制,尿钙排泄率增加,进而形成高钙尿诱发了含钙结石的形成[4-6]。我们推测CaSR在大鼠肾草酸钙结石的形成过程中起着非常重要的作用。本研究对CaSR在草酸钙结石形成过程中表达水平进行动态观察,对其在结石形成中的作用机制进行初步探讨。
材料和方法
1材料 SPF级雄性Wistar大鼠60只,6周龄左右,体质量(210±15) g,购自新疆医科大学实验动物中心[合格证号SCXK(新)2013-0001]。多功能光学显微镜及图像采集系统(BX40,日本Olympus公司),CaSR抗体(英国Abcam公司)。
2大鼠肾结石模型的建立及实验分组 参照孙稳[7]的方法制作大鼠肾结石模型。适应性喂养1周后按照随机数字表法将60只SPF级雄性Wistar大鼠分为空白对照组与结石组,每组各30只。空白对照组给予正常饮水每日每只2 ml灌胃2周;结石组给予1%乙二醇饮水和2%氯化铵每日每只2 ml灌胃2周。1 ~ 10周每组每周处死3只大鼠并取其双侧肾标本。
3肾组织形态学检测 连续10周肉眼观察大鼠肾形状、体积大小以及颜色变化;两侧肾各取一部分组织用甲醛液固定,石蜡包埋后使用解剖显微镜进行大体形态及结石晶体形成观察。……
