王一村,苏本玉，李 娜,许士明,高静静,周莉莉

(山东省产品质量检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东济南 250102)

阿胶也称驴皮胶,与人参、鹿茸一起被称为“中药三宝”[1]。其补血、增强免疫力、抗疲劳、抗辐射、抑制肿瘤、保护大脑、促进骨愈合生长以及保护心血管等功效都已被证实[2-4]。阿胶产业蓬勃发展,现已融入健康中国发展战略。然而,在巨大经济利益的诱惑下,阿胶行业内制假售假现象严重[5-6]。假阿胶及其制品虽在外观、气味、质地、口感等方面与真品无明显差异,但阿胶纯度低。有些掺假阿胶甚至威胁人体健康,严重扰乱了阿胶市场秩序。当前,阿胶的真假鉴别和纯度鉴定是该行业急需解决的瓶颈难题。

大量学者已建立并应用各类方法去辨别阿胶的真伪,比如高效液相色谱及质谱法[7-8]、光谱法[9-10]、酶联免疫法[11]、电泳法[12-13]以及分子生物学方法[14-15]等,但仍然无法对阿胶纯度和品质进行评估和评价。要从根本上解决此类问题,对阿胶进行定量分析才是关键。由于技术上的难点,目前行业内阿胶定量分析研究极少,几乎处于研究空白。令人欣喜的是,微滴数字PCR的出现有望解决阿胶定量这一难题。

微滴数字PCR(ddPCR)是一种对核酸进行精确定量的全新方法[16-17],它利用有限稀释及波松分布分析对目的DNA的拷贝数进行绝对定量[18]。因此对于源性成分分析来说,ddPCR不仅能进行定性分析,更重要的是能进行精确定量。该方法不依赖标准曲线和对照、不受PCR抑制物及PCR效率的影响,通过单分子计数方式实现基因拷贝数的定量,是绝对意义上的定量[19]。……