陈少敏,朱涵予,刘冬梅,许丹云,马爱民

(华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉 430070)

疏水蛋白(Hydrophobins)是目前已知的一类表面活性极强的小分子量两性蛋白,约含有100个氨基酸,分子量约为10 kDa,广泛存在于各种丝状真菌中。根据氨基酸排列方式和性质的不同,疏水蛋白分为Ⅰ型和Ⅱ型两种[1]。I型疏水蛋白自我装配形成的蛋白膜具有高度的不溶解性,即使在100 ℃水浴时也难溶解于2% SDS,只有在强酸如甲酸和三氟乙酸中才可以被解离[2-3]。疏水蛋白一个非常重要的特性就是当它们遇到亲水―疏水界面时就会发生自组装,形成一层两亲性的薄膜,厚度约为10 nm,性质十分稳定,且能改变界面的亲水性和疏水性[4-5]。因此,疏水蛋白在食品、医学、工业等领域具有强大的应用前景,如疏水蛋白的乳化性可以作为许多食品的稳定剂、疏水性可用于食品的保鲜[6-7]以及用作生物材料[8-9]、疏水蛋白SC3在小鼠模型也表现出较强的抗肿瘤作用[10]。

银耳(Tremellafuciformis),又称白木耳、雪耳等,在分类学上隶属于真菌门,担子菌纲,异隔担子菌亚纲,银耳目,银耳科,银耳属[11]。银耳被誉为“菌中之冠”,是一种珍贵的食用药用两用菌。银耳能产生酵母状的单核体芽孢,是一种良好的生物反应器[12-13]。

本实验室前期从平菇菌丝中克隆到Ⅰ型疏水蛋白基因Po.hyd[14],并在银耳芽孢中成功实现了异源表达[15]。为进一步改善疏水蛋白的性质,充分利用疏水蛋白的潜在应用和银耳的可食性优势,本实验试图用分子生物学的方法对疏水蛋白进行改造,将平菇疏水蛋白基因hyd与去除终止密码子的hyd拼接,形成融合疏水蛋白H-H,并导入到银耳芽孢中表达,希望改善疏水蛋白的性质,同时也为其他蛋白质的改性研究提供新思路。……