核桃多肽对高糖诱导HepG2胰岛素抵抗模型的影响
2018-05-09李丽琪徐华容阮金兰
李丽琪,徐华容,刘 阳,李 潇,蔡 依,阮金兰
(1武昌理工学院生命科学院/生物多肽糖尿病药物湖北省协同创新中心,武汉 430223;2武汉工程大学化工与制药学院,武汉 430073)
骨骼肌和肝脏是葡萄糖摄取的主要靶器官[1-5],当骨骼肌和/或肝脏对葡萄糖的使用发生异常时,胰岛素抵抗的发生机率将提高[6],所以探究HepG2用于建立体外胰岛素抵抗模型探索核桃多肽促葡萄糖吸收以及改善胰岛素抵抗的机制具有重要的意义。
1 试验材料
1.1 试验材料
L6细胞、HepG2细胞,中南民族大学药学院药理实验室;HT多肽、HT-1、HT-2,武昌理工学院生物多肽糖尿病药物湖北省协同创新中心自制(HT多肽批号:20141218;HT-1批号:20150816;HT-2批号:20150816)。
1.2 试验试剂
MEM-α培养基、胎牛血清,美国Hyclone公司;SDS-PAGE蛋白上样缓冲液,碧云天生物技术研究所;葡萄糖摄取细胞的测定试剂盒、葡萄糖摄取细胞的测定试剂盒、ECL化学发光检测试剂盒,Amersham-Pharmacia,Piscataway,USA;甘油、过氧硫铵、Tris-HCl、无菌PBS溶液、二甲亚砜,国药集团化学试剂有限公司;聚偏氟乙烯膜,Pall Corporation,Washington,USA;RIPA组织/细胞裂解液,北京阳光生物科技有限公司;BCA蛋白含量测定试剂盒,美国Abgent公司;门冬胰岛素注射液,丹麦诺和诺德公司;IRS-1抗体、p-IRS-1抗体、IRβ抗体、GLUT2抗体、β-actin抗体、Anti-rabbit IgG、Anti-mouse IgG,美国Cell Signaling公司;胰酶,美国GIBCO公司;双抗溶液,上海suer生物科技有限公司;丙烯酰胺、十二烷基硫酸钠、甘氨酸、四甲基已二胺、溴酚蓝、二硫代苏糖醇、甲醇、氨基丁三醇,美国Tedia公司。
1.3 试验仪器
Bio-RAD凝胶成像系统,美国Bio-Rad公司;Gel Image系统,APLEGEN,INC,USE;超净台,郑州宏朗仪器有限公司;CO2培养箱,上海博讯实业有限公司;XSM-20生物显微镜,宁波顺宇仪器有限公司;……
