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(1.曲阜师范大学生命科学学院,山东济宁 273100; 2.中国农业大学食品与营养工程学院,北京 100083)

桦褐孔菌(Inonotusobliquus),又称白桦茸(Chaga),是一种大型药用真菌,主要寄生在桦树上。桦褐孔菌中含有多糖、三萜类化合物、木质素、黑色素、叶酸衍生物等多种生物活性成分[1]。从16世纪开始,俄罗斯、波兰、芬兰和其他东欧国家的居民就开始食用桦褐孔菌,用于防治多种疑难杂症,如肝癌、胃癌、各类消化器官的癌症、糖尿病、心脏病[2]。目前国内外研究表明桦褐孔菌多糖具有抗肿瘤[3-4]、抗氧化[5-6]、抗血脂[7-8]、调节免疫力[9-10]、降血糖[11]等广泛的药理作用。但多糖不是一种纯粹的化学物质,而是聚合程度不同的物质混合物。多糖在单糖组成、相对分子质量分布、结构等方面具有不均一性,因此对多糖的分级纯化是探讨其化学结构和生物活性的基础[12]。

目前常用超滤膜分离法[13]、凝胶色谱法[14]、分布沉淀分离法[15]、阴离子交换色谱法[16]和大孔树脂柱色谱法[17]等方法分离纯化多糖。其中,超滤膜分离法具有能耗低、分离效率高、不损害活性等优点,但膜在分离过程中易被污染,造成膜渗透通量下降,从而给多糖的分离增加难度[18]。凝胶色谱法是利用凝胶的分子筛作用,根据不同分子大小和形状的多糖在层析柱中移动速度不同而达到分离纯化的目的,凝胶色谱分离纯化效果好,但上样量小,不适合作为分离纯化的第一步骤进行大量分离,主要用来进行少量样品的纯化。分步沉淀法是利用“相似相溶 ”原理,用不同浓度的低级醇或酮将不同相对分子质量的多糖沉淀出来,适用于溶解度相差较大的多糖的分离,有一定的局限性[19]。……