苦豆碱对缺血再灌注引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症应答的作用
2018-03-01张会超芮浩淼曹程浩杨凤鸣
张会超, 徐 里, 芮浩淼, 曹程浩, 杨凤鸣, 袁 彬
(1河南省中医院, 河南 郑州 450002; 2河南中医药大学, 河南 郑州 450008)
心肌梗死是常见的缺血性心脏病之一,具有较高的发病率和致死率,已成为影响人类健康的重要杀手。在经手术治疗恢复血流的过程中,常会触发心肌的缺血再灌注(ischemic reperfusion,I/R)损伤,从而引起心肌细胞的凋亡,诱发炎症反应,造成心力衰竭和心律失常等临床上常见问题,严重影响治疗效果,是目前心脑血管研究领域亟待解决的关键问题[1]。苦豆碱(aloperine,Alo)是从中药苦豆子中分离出来的一种生物碱,具有抗炎、抗肿瘤及抗感染的功效[2]。大量研究表明,苦豆碱能够减缓慢性压迫性损伤引起的神经疼痛,保护氧糖剥夺再灌注引起的海马神经元损伤[3-4]。近期研究证实,苦豆碱可以保护缺血再灌注诱发的急性肾损伤[5]。但是,苦豆碱是否可以保护缺血再灌注损伤的心肌尚不清楚。因此,本研究通过体外缺氧/复氧方法来模拟缺血再灌注(simulated ischemia-reperfusion,SI/R)损伤,分析苦豆碱对SI/R引起的H9c2心肌细胞损伤及炎性应答的影响,并探讨可能的作用机制,从而进一步为心肌缺血再灌注损伤防治提供新的治疗策略。
材 料 和 方 法
1材料
大鼠H9c2胚胎心肌细胞株购自ATCC。苦豆碱购自上海邦景实业有限公司(纯度>99%);新生牛血清(华美生物工程有限公司);DMEM培养基、噻唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)2,5-diphenyl tetrazo-lium bromide,MTT]和PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002购自Sigma;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒购自BioVision;丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒购自南京建成生物制品研究所;BCA蛋白质定量试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;抗……
