性别对L-精氨酸诱发的昆明小鼠慢性胰腺炎的影响*
2018-03-01范建伟许小凡辛嘉萁段丽芳
范建伟, 许小凡, 辛嘉萁, 吴 楠, 段丽芳, 张 红△
(陕西中医药大学 1基础医学院, 2医学科研实验中心, 陕西 咸阳 712046)
慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)是临床上常见的消化系统疾病,主要表现为胰腺实质的慢性炎症。CP病因复杂,以胰腺渐进性、不可逆性破坏引起胰腺内外分泌腺功能缺陷为特征,严重影响患者的生活质量[1]。L-精氨酸(L-arginine)腹腔注射是一种被普遍认可的复制急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)动物模型方法[2-3],近期也有学者开始尝试将其用以复制CP模型[4],实验结果显示L-精氨酸能够诱发胰腺的慢性炎症和纤维化,但是我们课题组在以往的实验中发现,此种方法复制的CP模型病变程度不够均一,相关指标的组内差异较大,影响了对CP实验药物疗效的评判。在探寻L-精氨酸造模不均一的原因时,本课题组发现在慢性胰腺炎的诱发过程中雄性小鼠的胰腺病理损伤程度似乎重于雌性小鼠,然而,不同性别小鼠对L-精氨酸造模的敏感性是否存在差异目前尚不清楚。因此,本研究通过观察L-精氨酸对CP 的诱导作用及性别对成模的影响,拟寻找一种稳定、均一的CP造模方法,确保CP相关药物疗效评价的可靠性。
材 料 和 方 法
1药品、试剂和仪器
L-精氨酸(A6969-100G)购于Sigma-Aldrich;抗F4/80(18705-1-AP)抗体购于Proteintech;抗α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA;bs-10196R)抗体和抗纤维连接蛋白(fibronectin,FN;bsm-33143M)抗体购于博奥森试剂公司;抗GAPDH(BM1623)抗体、HRP标记的羊抗兔(BA1054)及羊抗小鼠(BA1050)II 抗购于博士德试剂公司;ECL化学发光试剂盒购于碧云天;Masson染色试剂盒购于南京建成生物研究所;RNA提取试剂(9767)、反转录及real-time PCR试剂(RR047A、RR820A)购于TaKaRa;其它试剂为当地生物制剂公司提供的分析纯化学试剂。……
