Notch信号在脂多糖诱导的骨髓间充质干细胞中的作用*
2018-03-01王继荣岳影星代继桓杨舟鑫
王继荣, 卢 艳, 岳影星, 代继桓, 杨舟鑫△
(浙江医院 1浙江省老年医学重点实验室, 2放射科, 浙江 杭州 310013)
从骨髓中分离得到的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可以黏附在塑料培养瓶中快速增殖,并具有向脂肪、骨髓和软骨细胞分化的能力,因此可以作为细胞替代治疗的种子细胞[1]。MSCs具有免疫调节功能,在多种免疫相关疾病中被认为有良好的应用前景。最近研究表明,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可通过再生修复、免疫调节、抗氧化和抗凋亡等减轻炎症反应[2]。
Notch信号通路在进化上高度保守,通过相邻细胞之间的相互作用对造血干细胞、巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞及T和B淋巴细胞的发育和功能的发挥都有重要的调节作用,并参与肿瘤、病毒感染、炎症反应和自身免疫疾病等免疫相关疾病的发生[3]。Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号能增强Notch途径的活性,而且更重要的是,Notch1和Notch2活性形式的过量表达,会抑制TLR4开启的炎症细胞因子[如肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) 和白细胞介素6(intreleukin-6,IL-6)]的生成,并且促进抗炎细胞因子IL-10的生成[4]。
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可以被细胞表面TLR4识别,继而引发多种细胞的炎症反应[5]。然而,Notch信号是否参与LPS所诱导的炎症反应尚不明确。在本研究中,我们探讨了Notch信号通路对LPS所诱导的BMSCs增殖和炎症因子分泌的作用。
材 料 和 方 法
1主要试剂及仪器
小鼠骨髓间充质干细胞培养基为STEMCELL Technologies产品;PBS和胰酶为吉诺公司产品;脂多糖与DAPT为Sigma产品;RNA提取试剂盒为Qiagen产品;逆转录试剂盒以及荧光定量PCR试剂盒为Thermo产品;IL-6的ELISA试剂盒为eBioscience产品;趋化因子CXCL1的ELISA试剂盒为PeproTech产品。……
